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SARSCoVN蛋白和MAP19的相互作用
SARSCoVN蛋白和MAP19的相互作用【摘要】目的:研究SARSCoVN蛋白与MAP19之间的相互作用。
方法:利用免疫共沉淀试验验证SARSCoVN蛋白与MAP19的相互作用,并利用Westernblot检测SARSCoVN蛋白对MAP19表达量的影响。
结果:SARSCoVN蛋白与MAP19能够在细胞内相互作用,且SARSCoVN能够显著提高MAP19的表达量。
结论:SARSCoVN蛋白与MAP19能够在细胞内形成复合物,将为进一步研究SARSCoVN蛋白与MAP19相互作用的生物学功能提供实验基础。
【关键词】SARSCoVN;MAP19;相互作用[Abstract]AIM:Severeacuterespiratorysyndromecoronavirus(SARSCoV)istheetiologicalagentofSARS,anemergingdiseasecharacterizedbyatypicalpneumonia.Usingayeasttwohybridscreenwiththenucleocapsid(N)proteinofSARSCoVasabait,theNproteinwasfoundtointeractwithMAP19,anonenzymaticproteinofMASP(mannanassociatedserineprotease).TheinteractionbetweenSARSCoVNandMAP19wouldbefurthertestedincellsinthisarticle.METHODS:TheinteractionbetweenSARSCoVNandMAP19wasdemonstratedbyimmunocoprecipitation,andtheamountofMAP19influencedbySARSCoVNwasinvestgatedbyWesternblot.RESULTS:TheinteractionbetweenSARSCoVNandMAP19wasalreadydemonstratedbyimmunocoprecipitation.SARSCoVNgreatlyincreasedtheamountofMAP19.CONCLUSION:SARSCoVNcanbindwithMAP19incells.OurstudymaybeconductivetofurtherresearchintothemolecularmechanismofactionbetweenSARSCoVNandMAP19.[Keywords]SARSCoVN;MAP19;interactionSARS冠状病毒(SARSCoV)是SARS感染的元凶,以全长SARSCoVN蛋白为诱饵蛋白筛选人胎肝细胞cDNA文库时,发现SARSCoVN蛋白可能与MAP19相互作用。
SARSCoVN蛋白是SARS冠状病毒蛋白(SARSCoV)的结构蛋白,与病毒RNA结合形成核衣壳,是主要的抗原分子[1,2]。
MAP19是MASPs家族的成员,是MASP2的单一基因的选择性剪切产物[3]。
MASPs可通过MBL结合细菌或病毒表面的甘露糖残基结合而激活,MASP2可水解补体C4和C2,形成C3转化酶,是凝集素活化途径激活补体的重要的酶[4]。
凝集素活化途径是补体系统活化的第三条途径,也是机体早期抵抗病原微生物感染的一种防御机制。
MBL途径缺乏在成人和儿童中可诱发各种感染性疾病。
所以,一些病原微生物利用MBL来入侵细胞[5,6]。
本研究利用免疫共沉淀(IP)实验验证SARS
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