选修3专题一1.2-基因工程的基本操作程序.ppt

知识回顾：;知识回顾：;知识回顾：;4、基因进入受体细胞的载体;1.2基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;资料卡;自主学习活动三：;1、从基因文库中获取目的基因;基因组文库;1、从基因文库中获取目的基因;1、从基因文库中获取目的基因;1、从基因文库中获取目的基因;原核细胞的DNA;①不编码蛋白质;真核细胞的DNA;真核细胞的基因结构;下列关于基因结构的认识中，正确的是（）

A.大豆基因中的内含子是能够编码蛋白质的序列

B.乳酸菌与酵母菌基因结构中都存在外显子和内含子

C.大肠杆菌基因与RNA聚合酶结合位点位于编码区的下游

D.水稻细胞基因的编码区中存在非编码序列;下列关于基因结构的认识中，正确的是（）

A.大豆基因中的内含子是能够编码蛋白质的序列

B.乳酸菌与酵母菌基因结构中都存在外显子和内含子

C.大肠杆菌基因与RNA聚合酶结合位点位于编码区的下游

D.水稻细胞基因的编码区中存在非编码序列;(多选)原核细胞与真核细胞基因结

构的共同特点是（）

A.编码区都有能编码蛋白质的序列

B.编码区都是连续的

C.非编码区都能调控遗传信息的表达

D.非编码区都有RNA聚合酶结合的

位点;(多选)原核细胞与真核细胞基因结

构的共同特点是（）

A.编码区都有能编码蛋白质的序列

B.编码区都是连续的

C.非编码区都能调控遗传信息的表达

D.非编码区都有RNA聚合酶结合的

位点;④如何从基因文库中得到所需要的基因？;①概念：;①概念：PCR全称为_______________，是一项在生物_____复制______________的核酸合成技术。;③条件：_____________________________(前提条件)、_____________________、__________、____________________.;⑥结果：;在遗传工程中，若有一个控制有利性状的DNA片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应给予的条件是

①双链DNA分子为模板

②ATGTG或TACAC模板链

③四种脱氧核苷酸④四种核苷酸

⑤DNA聚合酶⑥热稳定DNA聚合酶

⑦引物⑧温度变化⑨恒温

A.①③④⑦⑧⑨B.①②④⑥⑦⑧

C.①②⑥⑦⑨D.①③⑥⑦⑧;3、人工合成目的基因;4.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是

①从基因文库中获取目的基因

②利用PCR技术扩增目的基因

③反转录法

④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成

A.①②③④B.①②③

C.②③④ D.②③;一、目的基因获取的常用方法;阅读教材第11页的“基因表达载体的”构建内容，请小结这部分内容，并提出你的疑问。;思考：

作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？;不可以。

因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是：

(1)生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达；;(2)通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；;

(5)有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。;二、基因表达载体的构建——核心;复制原点;思考讨论：;(1)用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。

(2)用_____________切断目的基因，使其产生_________________。

(3)将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量___________，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）;下列关于基因表达载体的叙述不正确的是

A.启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是起始密码

B.启动子和终止子都是特殊结构的DNA短片段，对mRNA的转录起调控作用

C.标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选

D.基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同而有所差别;下列关于基因表达载体的叙述不正确的是

A.启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是起始密码

B.启动子和终止子