不同龄大鼠胃酸、胃内细菌与胃肠道感染的相关研究.doc

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不同龄大鼠胃酸、胃内细菌与胃肠道感染的相关研究

不同龄大鼠胃酸、胃内细菌与胃肠道感染的相关研究【摘要】目的研究不同鼠龄大鼠胃内pH值的变化与胃部细菌的关系,观察胃内细菌变化是否能导致大鼠胃肠道的炎症反应。

方法Wistar大鼠30只,其中3月龄的非老龄大鼠20只,22月龄的老龄大鼠10只,分为非老龄奥美拉唑组、非老龄对照组和老龄组。

2w后测大鼠胃内pH值,取大鼠胃组织做细菌培养,观察大鼠是否有腹泻,并做胃组织病理切片检查。

结果与非老龄对照组大鼠相比,老龄组大鼠胃内pH值、胃部细菌数量无明显差异(P>0.05);非老龄奥美拉唑组大鼠胃内pH值、胃部细菌数量差异明显(P<0.01)。

3组大鼠实验期间未发现明显的腹泻,观察病理切片,胃组织无明显炎细胞浸润。

结论胃内pH值与胃部细菌数量不随鼠龄的增加而变化。

随胃内pH值升高,大鼠胃部细菌数量增加,但未发生明显的胃肠道炎症。

【关键词】大鼠;胃酸;细菌过度生长;胃肠道炎症;衰老正常人胃液的pH值为1.5~2.0,可以杀死随食物进入胃内的细菌,通常正常人的胃内可以分离出少量细菌,主要是来源于口腔和食物的过路菌,含量一般在103CFU/ml以下〔1〕。

胃酸状态对细菌在胃内的生存非常重要。

目前临床上常用的抑制胃酸的药物包括组胺H2受体阻滞剂及质子泵抑制剂(PPI),其中PPI可使胃内pH值明显增高,这样有可能造成胃内细菌过度生长,而胃内细菌过度生长是否能引起胃肠道的炎症呢?本研究从动物实验着手,研究大鼠胃内pH值与胃部细菌数量的关系,并研究衰老对胃酸及胃部细菌的影响,观察胃内细菌的繁殖是否能引起胃肠道的炎症。

1材料与方法1.1材料1.1.1主要仪器电热恒温培养箱,重庆四达公司。

电子天平,上海精天电子仪器厂。

OlympusBH2显微镜,日本Olympus公司。

1.1.2主要试剂广泛及精密pH值试纸,北京化工厂。

奥美拉唑镁肠溶片MUPS,阿斯利康制药有限公司。

一次性血琼脂培养基,天津市金章科技开发有限公司。

1.2方法1.2.1实验对象30只Wistar大鼠(解放军总医院动物实验中心提供),其中20只3月龄,体重251.4~310.9g,随机分2组:

非老龄对照组10只,非老龄奥美拉唑组10只;另有老龄组10只,22月龄,体重402.4~820.7g。

组内大鼠雌雄各半。

1.2.2用药方法奥美拉唑肠溶片分散于蒸馏水中,浓度为0.75mg/ml,分散后于30min内灌胃。

非老龄奥美拉唑组以奥美拉唑灌胃,2ml/100g体重,每天2次(15mgkg-1d-1),非老龄对照及老龄组均以等量的生理盐水灌胃。

3组的灌胃时间均为2w。

在2w内观察各组大鼠是否出现腹泻情况。

1.2.3胃液pH值测定2w后,非老龄奥美拉唑组和非老龄对照组、老龄组大鼠均禁食24h,禁水12h。

之后用10%水合氯醛(约2ml/kg)腹腔注射麻醉,在严格的无菌条件下剖腹并游离胃,用止血钳夹住贲门和幽门。

于前胃区剪一小切口,用无菌注射器抽出约1ml胃液,用广泛pH试纸及精密pH试纸测出胃液pH值。

1.2.4留取标本取前胃及后胃组织各一块,放入已称量好的无菌Eppendorf管中,电子天平称重,置500l生理盐水中;另取后胃组织一块,浸泡于4%的甲醛溶液中。

1.2.5细菌培养把胃组织在无菌研磨器中研成匀浆,根据不同的胃液pH值取1、10或100l组织研磨液接种于普通血平板,在37℃培养箱中需氧培养24h观察结果。

计数细菌的菌落数,细菌计数单位为CFU/g。

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