SARS 冠状病毒N 基因的扩增与克隆_21.doc

PAGE1/NUMPAGES1

SARS冠状病毒N基因的扩增与克隆

栏目：

论著基础研究SARS冠状病毒N基因的扩增与克隆作者：

肖维威翼飞分子生物学研究所，广东广州510515；州总医院分子肿瘤学研究所，广东广州510010)1；马文丽1；吴清华1；张宝1；郑文岭1；王艳2(1；毛向明1第一军医大学2广州军区广1；彭1；宋艳斌摘要：

目的RT-PCR扩增、克隆SARS冠状病毒N蛋白基因。

方法根据GenBank数据库中TOR2株的全基因组序列，利用PrimerPremier5.0软件设计引物RT-PCR巢式扩增SARS冠状病毒的N基因，PCR产物克隆后进行测序鉴定。

结果序列分析表明，pMD18-T载体中已成功重组了N基因。

结论N蛋白基因的扩增、克隆成功，为N蛋白的表达、N蛋白结构与功能的研究奠定了基础。

关键词：

严重急性呼吸综合征；N基因，冠状病毒；逆转录-聚合酶链反应中图分类号：

Q786文献标识码：

A文章编号：

1000-2588(2004)01-0039-03AmplificationandcloningoftheNgeneofSARS-associatedcoronavirusXIAOWei-wei1；MAWen-li1；ZHANGBao1；WANGYan1；MAOXiang-ming1；PENGYi-fei1；SONGYan-bin1；WUQing-hua1；ZHENGWen-ling21InstituteofMolecularBiology,FirstMilitaryMedicalUniversity,Guangzhou510515,China;2InstituteofMolecularOncology,GuangzhouGeneralHospitalofGuangzhouCommand,Guangzhou510010,ChinaAbstract:ObjectiveToamplifyandclonetheNgeneofsevereacuterespiratorysyndrome-associatedcoronavirus.MethodUsingprimerPremier5.0software,twopairsofnestedPCRprimersweredesignedtoamplifytheNgene.Afterpurification,theamplifiedproductswereclonedintopMD18-Tvectors,andthepositivecloneswiththeinsertedfragmentswereidentifiedbysequenceanalysis.ResultsTheamplifiedproductswasabout1375bpinlength,andsequenceanalysisdemonstratedthattheNgenefragmentshadbeensuccessfullyinsertedintopMD18-Tvectors.ConclusionThesuccessfulamplificationandcloningofNgenefacilitatesfurtherinvestigationoftheexpressionoftheNproteinandstudyofitsstructureandfunctions.Keywords:severeacuterespiratorysyndrome;SARS:N-gene,coronavirus;reversetranscription-polymerasechainreaction收稿日期：

2003-07-01作者介绍：

肖维威(1974-)，女，1998年毕业于第一军医大学，现为第一军医大学在读博士研究生，讲师，电话：

02089097通讯作者：