人教版高中生物选择性必修第2册 DNA技术的基本工具.pptxVIP

杀死害虫

棉花细胞

什么是目的基因?

什么是受体细胞?什么是目的基因的表达产物?

苏云金杆菌

毒蛋白基因毒蛋白

抗虫棉的培育

基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外

DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做_DNA重组_技术。

基因工程的诞生理论基础

1.基因是控制生物性状的结构与功能单位

2.遗传信息传递都遵循中心法则3.生物界几乎共用一套遗传密码

个理论基础

理论基础

1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.都遵循碱基互补配对原则

3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构

蛋白质一→性状

重组DNA

转录

翻译

复制

RNA

3.1重组DNA技术的基本工具

图1-2双链DNA结构和磷酸二酯键位置

T

C

磷酸酯键

磷酸二酯键—

G

T

脱氧核糖

脱氧

脱氧

P

P

P

C

5’

P

0

脱氧

核糖

OH

HO

0

量

0

3’

d

P

0

航氧

核糖

OH

HO

最

售

0

d

P

0

脱氧

HO

3’

核糖

3)

OH

0

d5’

含氮碱基晋载号

含氮碱基晋透号

晋遥号

含氮碱基

5

…GGG…………日的基因碱基序列

目的基因所在的DNA

…

CCC

CGGG

基因工程是在DNA上进行的_分子_水平的设计施工，需要有专门的工具。

限制性内切核酸酶(简称限制酶)

…GAATTC

CTTAAG

…GAATTC

…CTTAAG

之间切断磷酸二酯键)。

限制酶的名字怎么起?

限制酶的名字是怎么起的呢?是用生物属名的头一个字母与种名的头两个字母，组成了3个字母的略语，以此来表示这个酶是从哪个生物中分离出来的。例如，一

种限制酶是从大肠杆菌(Escherichiacoli)的R型菌株分离来的，就用字母EcoR表示；如果它是从大肠杆菌R菌株中分离出来的第一个限制酶，则进一步表示成

EcoRI。

限制酶的专一性体现在：一种限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，

并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

大肠杆菌中的一种叫做EcoRI的限制酶，能够专一识别DNA中的GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开(实质是在鸟嘌呤脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸

(1)实例1—EcoRI限制酶：EcoRI识别序列为GAATTC,EcoRI切割部位为GA之间的磷酸二酯键。

(2)实例2——SmaI限制酶：SmaI识别序列为CCCGGG,SmaI切割部位为CG之间的磷酸二酯键。

SmaI能够专一识别DNA中的GGGCCC_序列，并在G和c之间将这段

序列切开(实质是在鸟嘌呤脱氧核苷酸与胞嘧啶脱氧核苷酸之间切断磷酸二酯键)。

当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的

中心轴线处切开时，产生的则是平末端。EcoRI切割DNA产生_黏性_末端，Smal切割DNA产生平末端。

1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

1、已知限制酶I的识别序列和切点是—GGATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切

点是—↓GATC—。

(1)能被限制酶I切割的DNA,能(能/不能)被限制酶II切割；

(2)能被限制酶I切割的DNA,不一定能(能/不能/不一定能)被限制酶I切割。

限制酶

BamHII

EcoRI

Sau3AI

KpnI

识别序列切割位点

GGATCC-

1111I

CCTAGG-

T

1

-GAATTC-

1I1II

-CTTAAG-

T

GATC-

-CTAG

GTACC-

-CCATGG-

酶切

结果

GATCC-

I

CCTAG

-GAATIC-

-CTTAA

GATC-

-CTAG

GGTACC

-UA1

练习

现有来自两种生物的DNA片段1和DNA片段2,用同一种限制酶处理

后，DNA片段1和2带有_相同_的黏性末端。在一个混合体系中，DNA片段1和2随机碰撞在一起时，黏性末端之间会自发形成氢键,但不同DNA片段骨架上的缺口无法自动连接。

DNA连接酶的作用是：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

2.DNA连接酶——“分子缝合针”

GAATTC

CTT