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细菌培养实验报告书写--第1页
细菌培养实验报告书写
篇一：细菌的生理生化反应实验报告
细菌的生理生化反应实验报告
【实验目的】
了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生
理生化反应方法。了解生理生化反应在鉴别细菌中的意义。
【实验原理】
通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些第五的利
用能力、代谢产物的类型等来研究微生物带血的多样性。某
些细菌产生色氨酸酶，能分解培养基蛋白胨中的色氨酸，产
生吲哚，吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应，形成红色的
玫瑰吲哚，为吲哚反应阳性。微生物发酵葡萄糖成丙酮酸，
2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱
性条件下与肌酸类物质反应，生成红色化合物为V.P.反应阳
性。有些细菌发酵糖类产生有机酸较多，使发酵液的pH下
降到4.2以下，当加入甲基红试剂后，时发酵液变红色，为
甲基红反应阳性。某种微生物能以某种糖类为碳源，产酸产
气，则判断为发酵这种糖。
【实验材料和用具】
1.菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草
芽孢杆菌。
2.培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、
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细菌培养实验报告书写--第1页
细菌培养实验报告书写--第2页
糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗
糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂
3.仪器：酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、
高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管、
杜氏小管。
【实验方法】（一）V-P反应
1.试管标记取5只装有葡萄糖蛋白胨水培养基的试管，
分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆
菌和空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应
试管的培养基中。空白对照不接种。置37度恒温培养箱中
培养24-48h。
3.观察记录去除以上培养物，分别取出2ml培养液加
入另外5支相应编号的空试管中，加入与培养液等量的V-P
试剂，充分震荡2min。放置37度恒温培养箱中培养30min
观察记录结果。
（二）甲基红实验
于V-P实验留下的培养液中，分别加入2-3滴甲基红指
示剂，立即观察培养液的颜色变化
（三）吲哚实验
1.试管标记取5只装有蛋白胨水培养基的试管，分别
标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和
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细菌培养实验报告书写--第2页
细菌培养实验报告书写--第3页
空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应
试管的培养基中。空白对照不接种。置37度恒温培养箱中
培养24-48h。
3.观察记录在培养基中加入乙醚1-2ml，经充分振荡使
吲哚萃取至乙醚中，静置片刻后乙醚
层浮于培养液的上面，此时沿试管壁缓慢加入5-10滴
吲哚试剂。观察记录结果
（四）糖发酵试验
1.试管标记取分别装有葡萄糖、蔗糖、乳糖发酵培养
液试管各4支，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形
菌
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