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HCV-RNA和抗-HCV的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义
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【摘要】目的：探讨HCV-RNA和抗-HCV联合检测诊断丙型肝炎的临床意义。方法：选择本院收治的120例丙型肝炎患者为研究样本，对其临床资料进行回顾性分析，将其中60例急性丙型肝炎患者设为鉴别组，60例慢性丙型肝炎设为对照组，测定患者血清HCV-RNA、抗-HCV和ALT水平。结果：观察组HCV-RNA和抗-HCV同时阳性率低于对照组，且HCV-RNA阳性、抗-HCV阴性率高于对照组，P0.05。HCV-RNA阴性、抗-HCV阳性率在两组患者中的占比均较低，对比无显著差异，P0.05。120例丙型肝炎患者中有78例ALT异常，且HCV-RNA定量水平越高，ALT异常率越高，二者呈正相关性，P0.05。结论：HCV-RNA可作为反映HCV复制的可靠指标，联合抗-HCV检测和ALT结果有助于准确诊断早期丙型肝炎，为临床后续治疗提供重要的参考数据。
【关键词】HCV-RNA；抗-HCV；联合检测；丙型肝炎；临床意义
丙型肝炎属于一种世界性的恶性传染性病症，临床发病率较高，患者早期症状轻微，但随着病情进行性发展，超过60%的患者会进展为肝硬化和肝癌，危及到生命安全[1]。关于丙型肝炎病毒含量和肝损伤之间的关系目前临床仍然没有明确定论，且丙型肝炎治疗时程长，如何选择一套方便快捷、敏感性高的检测方法来对患者的早期诊断和后续治疗进行实时监测是临床一直关注的课题[2]。本次研究采取回顾性分析法，对HCV-RNA和抗-HCV联合检测诊断丙型肝炎的临床意义进行了研究，分析了丙型肝炎不同进展期血清HCV-RNA、抗-HCV的阳性率和与ALT水平的关系，希望能为临床检验提供参考。
1资料与方法
1.1一般资料
2015年4月~2017年5月，选择本院收治的120例丙型肝炎患者为研究样本，对其临床资料进行回顾性分析，将其中60例急性丙型肝炎患者设为鉴别组，60例慢性丙型肝炎设为对照组，鉴别组男女比为35：25，年龄18~59岁，中位年龄37.64岁；对照组男女比为37:23，年龄20~58岁，中位年龄38.02岁。两组患者基线资料对比无显著差异（P0.05），具有可比性。
纳入和排除标准：所有患者均经本院诊断确诊为急/慢性丙型肝炎，且接受检验前3个月内无免疫抑制剂使用史；排除甲、乙、戊型肝炎患者。
1.2方法
测定两组患者血清HCV-RNA、抗-HCV和ALT水平。仪器为罗氏公司（Roche）提供的LightCycler荧光PCR检测仪。
①HCV-RNA荧光定量检测。HCV-RNA的荧光定量PCR试剂盒由上海强生公司提供，以带分离胶专用试管抽取患者3mL空腹静脉血，再取经高压灭菌处理过的离心管，加入200L裂解液后再分别加入200L血清，漩涡振荡15s，混匀后3000r/min离心10s，放置于-80℃冰箱保存。按照试剂盒说明书方法提取RNA模版，并LRNA模版加入到18LRT-CRP反应液中，混匀后置入Roche专用毛细管。按照浓度108、107、106、105、104、103设置6个HCV-RNA标准品对照，并设空白管和阴性对照，用Roche荧光定量检测仪对各反应管进行RT-PCR扩增，42℃持续30min，93℃预变性3min，93℃持续5s，60℃持续10s，72℃持续10s，共计45个循环。以HCV-RNA标准品对数值为横坐标，实际检测到的Ct值为纵坐标，仪器将自动根据标准曲线算出丙肝病毒载量。
②抗-HCV以酶联免疫吸附法测定（ELISA），试剂盒由上海强生公司提供，抗原为基因工程抗原和合成多肽抗原，严格遵循说明书和免疫学要求进行操作。
③ALT以干化学法测定，仪器为Reflotronplus全自动干式生化分析仪和专用试剂条，严格按照试剂盒说明书操作。
1.3观察指标
①HCV-RNA定量参考值范围为103~105copies/mL，103copies/mL判定为阳性；②抗-HCV检测的OD值/COV值≥1判定为阳性；③ALT正常参考值范围为5~40U/L。
1.4数据统计分析
采用Excel2016对数据进行统计分析，计量资料以（x+s）表示，t检验；计数资料以n（%）表示，卡方检验。相关性以Spearman分析，P≤0.05表示统计结果存在显著差异。
2结果
2.1HCV-RNA和抗-HCV联合检测结果
观察组HCV-RNA和抗-HCV同时阳性率低于对照组，且HCV-RNA阳性、抗-HCV阴性率高于对照组，P0.05。HCV-RNA阴性、抗-HCV阳性率在两组患者中的占比均较低，对比无显著差异，P0.05。
3讨论
丙型肝炎病毒是导致肝硬化、肝纤维化、慢性肝炎和肝细胞癌的主要因素，及早诊治是终止或延缓病情进展、改善患者预后的主要措施[3]。检测血清
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