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酶的发酵生产

所有的生物体在一定的条件下都能产生多种多样的酶。酶在生物体内产生的过程，称为酶的生物合成。

经过预先设计，通过人工操作控制，利用细胞（包括微生物、植物细胞和动物细胞）的生命活动，产生人们所需要的酶的过程，称为酶的发酵生产。

酶的发酵生产是现在酶生产的主要方法。;第一节酶生物合成的基本理论

酶是生命活动的产物，又是生命活动必不可缺的条件之一。酶的生物合成主要是RNA和蛋白质的生物合成过程。

一、RNA的生物合成———转录

根据分子结构和功能的不同，核糖核酸（RNA）可以分为转移核糖核酸（tRNA）、信使核糖核酸（mRNA）和核糖体核糖核酸（rRNA）3类。

;RNA的生物学功能主要有3个方面：

（1）在某些RNA病毒中，双链RNA作为遗传信息的载体。

（2）在蛋白质的生物合成中，各种RNA起着重要作用。其中，tRNA作为氨基酸载体并由其???的反密码子识别mRNA上的遗传密码；mRNA作为蛋白质合成的模板，由其上的三联体密码控制蛋白质分子中的氨基酸排列顺序；rRNA与蛋白质组成核糖核蛋白体（核糖体），作为蛋白质生物合成的场所。

（3）作为核酸类酶，催化有关生化反应。;以DNA为模板，以核苷三磷酸为底物，在依赖DNA的RNA聚合酶（转录酶）的作用下，生成RNA的过程称为转录。

RNA的转录过程主要包括3个步骤，即转录的起始、RNA链的延伸和RNA链合成的终止。;第二节蛋白质的生物合成———翻译

以mRNA为模板，以各种氨基酸为底物，在核糖核蛋白体上通过各种tRNA、酶和辅助因子的作用，合成多肽链的过程，称为翻译。翻译是将mRNA分子上的碱基排列次序转变为多肽链上氨基酸排列次序的过程。

不同的生物，其蛋白质的生物合成过程虽然有些差别，但是基本过程均包括氨基酸活化、肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止及新生肽链的加工等。;1.氨基酸活化生成氨酰-tRNA

氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的催化作用下，由ATP提供能量，与特定的tRNA结合生成氨酰-tRNA。其反应式如下：;对于真核生物，肽链合成时的第1个氨基酸是甲硫氨酸，起始tRNA是Met-tRNAMet。而对于大肠杆菌等原核生物，肽链合成时的第1个氨基酸是甲酰甲硫氨酸，起始tRNA是fMet-tRNAF。它是在甲硫氨酸与tRNAF结合后，再在甲酰转移酶的作用下，经甲酰化而生成甲酰甲硫氨酰-tRNAF。;2.肽链合成的起始

原核生物肽链合成的起始阶段是在GTP和起始因子（initiationfactor）的参与下，核糖体30S亚基、fMet-tRNAF、mRNA和50S亚基结合，组成起始复合物的过程。

主要包括5个步骤：;30S亚基与起始因子IF3结合。

30S亚基与mRNA结合，形成30S-IF3-mRNA复合物。

fMet-tRNAF与起始因子IF2以及GTP结合，生成fMet-tRNAF-IF2-GTP。

(在起始因子IF1的参与下，fMet-tRNAF-IF2-GTP与30S-IF3-mRNA结合生成30S起始复合物。在此30S起始复合物中，fMet-tRNAF上的反密码子正好与mRNA上的起始密码子AUG结合。

50S亚基与上述30S起始复合物结合，形成完整的70S核糖体。同时放出IF1、IF2、IF3，并使GTP水解生成GDP和Pi。在此70S核糖体形成时，fMet-tRNAF位于70S核糖体的“P”位（肽酰基位），而它的“A”位（氨酰基位）是空位。;真核生物和原核生物的核糖体亚基组成、肽链合成的起始因子、起始tRNA以及亚基的结合次序等均有所不同。

原核生物为70S核糖体，由30S亚基和50S亚基组成；而真核生物的核糖体为80S核糖体，由40S亚基和60S亚基组成。

原核生物中有3种起始因子IF1、IF2、IF3；而真核生物中有10种左右的起始因子，主要功能与原核生物的起始因子相似，相对分子质量均比原核生物的起始因子大。

原核生物的起始tRNA是fMet-tRNAF；而真核生物的起始tRNA是Met-tRNAMet。

原核生物的30S亚基先与mRNA结合，再与fMet-tRNAF结合，最后与50S亚基结合，生成70S核糖体；而真核生物的40S亚基先与Met-tRNAMet结合，再与mRNA结合，最后与60S亚基结合生成80S核糖体。;3.肽链的延伸

在延伸因子（elongationfactor）的参与下，与mRNA上的密码子对应的氨酰-tRNA进入核糖