单胞藻扩大培养技术的研究进展.docx

?

?

单胞藻扩大培养技术的研究进展

?

?

刘海娟陈瑞芳曾梦清游出超

摘要：对单胞藻的扩大培养技术进行综述，并对贝类育苗生产过程中的单胞藻培养实践经验进行总结，为大规模单胞藻培养提供参考。

关键词：单胞藻扩大培养生产应用

：S963.21：A：1674-098X（2014）06（b）-0228-02

单胞藻是水产育苗和养殖的基础饵料，具有营养丰富、适应性强、生长快速和易培养等特点[1-3]。单胞藻种类繁多，富含蛋白质、维生素、多不饱和脂肪酸、活性多糖等，目前也应用于食品业、能源产业等，市场前景十分广阔。

随着养殖产业日趋成熟，大规模的生产性育苗养殖正在开展，对配套的基础饵料单胞藻培养技术提出较高要求。但在单胞藻培养过程中，往往因为各种原因而失败，给生产带来直接影响，严重时致生产无法开展。查阅文献发现，目前研究重点多集中在保种和小规模的培养阶段，对培养条件等做了诸多的阐述[4]，但针对大规模生产性扩大培养具体操作的技术要领鲜少报道。本文对文献中人工育苗生产过程中的单胞藻扩大培养技术进行归纳总结，从单胞藻的扩大培养方法、敌害防治和生产应用情况三个方面做详细阐述。

1扩大培养方法

1.1培养用海水

培养用海水需经过消毒杀菌处理后才能使用。过滤海水，即外海海水经沉淀沙滤黑暗处理后导入单胞藻培育车间，经300目以上筛绢袋过滤后加入培育池。接种前用50g/m3漂白粉处理24h。池中连续充气，气量小且均匀为好，接种前加入等量的Na2S2O3中和余氯，将气量调大，使其快速溶解中和[5]。一般放置40min～1h即可，准确测定使用简易的淀粉碘化钾试剂测定余氯。余氯清除后加入肥料，使用植物生长素50～70g/m3，溶解后泼洒于培养水中。陈怀定[6]研究发现在单胞藻培养液中添加有机肥，例如酵母膏、发酵鱼粉和鱼汁等，可加长藻类稳定周期。

1.2培养设施

扩大培养的车间顶为透明的塑料薄膜，两面玻璃，车间内用黑帘等调节光照。培养容器规格小的水泥池或黑桶和规格较大的水泥池等。水泥池内壁及上边缘涂有防水漆，光滑提高吸光性。欧俊新[7]研究提出使用全封闭式塑料薄膜培养金藻的方式，具有节约便宜、易于管理和不易污染的特点，在实践中取得较好效果。

1.3培养方法

选择晴朗天气，一次性接种即培养容器加满水用于接种藻液，这样既起到池壁消毒的作用又充分利用了培育空间。

选择处于指数生长期的藻种进行接种。将保种室中藻种液接入小规格的培养容器，池底充气，开始气要小，以培养液面有微波为准，通过调整培育池上方的黑色网帘降低光照强度。随着培育时间延长，藻液颜色逐渐变深，可适当调大充气，增强光照强度，但是在天气炎热的正中午，应适当调整光照，防止光线过强引起藻液变质死亡。小池培养一般3～5d。

用水泵将小池中的藻液接种到大规格的水泥池中，一般为一对一接种。有研究表明培养条件较优时可分扩两池亦能培养，藻液浓度较深要持续培养时，要适当添加肥料，保证营养供给[8]。较浓的藻液可重复增加培养用海水继续培养，实施补充肥料即可。为提高藻类的光合作用效率，适当加入NaHCO3和NaSiO3。大池培养一般3～6d。

金藻类对环境要求较高，严格要求每个接种过程，与其他藻种隔离较好[9-11]。角毛藻类由于其喜光的特性，应在培养过程中加大光照强度，充气不必太大或停止充气，其接种密度也可降低，在光线充足的情况下，角毛藻生长迅速，且不易污染[12-13]。小球藻类由于其沉降性和喜氮的特性，培养过程中始终保持较大气量并在培养过程中加入适量尿素，提高水体中的氮含量[14-15]。扁藻喜磷，培养过程中添加磷肥，提高水体中的磷含量[16]。扁藻在培养条件较好时，可根据生产需求进行高密度的同级扩种，这样既能快速扩大培养又能有效的利用生产空间。

1.4培养管理措施

单胞藻是利用CO2进行光自养的，通入不同浓度的CO2浓度培养的藻细胞，其pH通过CO2-HCO3-调节，CO2浓度越高pH下降越明显，而pH值对细胞中酶的活性有一定影响，包括亲和CO2的酶，所以适当的CO2浓度可促进藻细胞生长[17-19]。本研究组在藻类培养过程中，通过加入一定浓度的NaHCO3来增加水中CO2浓度，取得了良好的效果。

水温是影响单胞藻生长的最重要因素之一，而华南地区高温天气持续时间较长，所以必须提出有效应对高温的措施。采用低温地下水对藻液进行降温[20-21]，此种方法适用于一、二级藻种，可以保证用于扩种的藻种质量，有一定的借鉴价值，但大规模的藻类培养无法实现。本研究组通过生产实践尝试了几种方法来降低高温影响：适时给封闭车间通风，调整黒帘遮挡强光，加大充气，在车间中间走道泼洒淡水。这些措施一般在天气较炎热、晴朗的时候采用，而且应针对不同的藻种做相应的调整，因为每种藻都有各自的适温范围和最适温度