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《第1章发酵工程》
第2节微生物的培养技术及应用
一微生物的基本培养技术
必会知识考点梳理拓展延伸易错警示
必会知识一培养基的配制
1.培养基的概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基,用
以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
2.培养基的分类:按照物理性质不同分为三类。
培养基种类特点用途
液体培养基不加凝固剂工业生产
固体培养基加凝固剂,如琼脂微生物分离、鉴定等
半固体培养基加少量凝固剂观察微生物运动、保存菌种
3.营养组成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,此外还需要满足微生物生长对
pH、特殊营养物质以及O的需求。以1000mL牛肉膏蛋白胨培养基为例。
2
1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
培养基组成提供的主要营养
牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨10g氮源和维生素等
NaCl5g无机盐
HO定容至1000mL水
2
(1)牛肉膏又称牛肉浸膏,是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕
褐色的膏状物。有牛肉自然香味,易溶于水,水溶液呈淡黄色。
(2)蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥形成的淡黄色粉剂,具有特殊的肉香。蛋白质
经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。
(3)牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的普通细菌基础培养基。由于这种培养基中含有一般细菌生长
繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖使用。在该培养基中,牛肉膏是主要的碳源,
蛋白胨是主要的氮源。
4.培养基中碳源和氮源的主要来源及作用
来源主要作用
碳源无机碳源:CO、NaHCO等:主要用于合成微生物体内的各种有
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有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等机物,有机碳源是异养微生物的主
要能源物质
氮源无机氮源:N、氨、铵盐、硝酸盐等:主要用于合成蛋白质、核酸以及
2
有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等含氮的代谢产物
不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氨源
(1)自养微生物能利用无机碳源(比如空气中的CO),培养基中不用添加碳源;
2
(2)固氮微生物可利用N作为氮源,培养基中不用加入氮源。氨是硝化细菌的氨源,硝化细菌利用氧化
2
环境中的氨时所释放的化学能,最终将二氧化碳转化为储存能量的有机物,进行化能合成作用。对异养微
生物来说,含C、H、O、N的有机化合物(尿素除外)既可能是碳源,又可能是氮源和能源。
5.其他条件:在提供主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对H、O,以及特殊营养物质
的需求。比如,培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素:培养霉菌时,需将培养基调至酸性:培养
细菌时,需将培养基调至中性或弱碱性:培养厌氧微生物时,需提供无氧的条件。
6.培养基配制原则
(1)目的明确:不同微生物的生长需求不同,根据培养目的配制培养基。
(2)营养要协
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