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试论Ｒａｎ基因功能及研究

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[论文关键词]Ran基因?功能?研究?

[论文摘要]由于Ran存在广泛，功能多样。?Ran及其结合蛋白参与调控细胞周期中的多个过程，对于小分子GTPase?Ran的研究，越来越多的受到了关注。对Ran及其功能作简单的介绍。?

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Ran（Ras-related?nuclear）也称为TC4，最初是作为人类cDNA的一个可译框而被发现，并首先从人类畸胎瘤细胞中分离纯化得到的一种蛋白质，根据其大小（216个氨基酸残基）及其规范的序列基元DTAGAE而被确认为与Ras相关的GTPase，分子量是24Da，从真核生物到人都高度保守。?

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一、Ran与Ras的关系?

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在HeLa细胞中，Ran是Ras家族种表达最丰富的成员，占细胞蛋白总量的0.4?%，与ras家族的其他成员相比，其C末端缺乏一个作为翻译后异戊二烯化受体的半胱氨酸残基，而拥有一个酸性C末端序列DEDDDL。这是Ran的作用基础。Ran和ras一样，有活性的RanGTP和无活性RanGDP。RanGTP和RanGDP的浓度受Ran的调节物GFE（guanine?nucleotide?exchange?factor）和RanGAP精密调控。GFE、RCC1（regulator?of?chromosome?condensation?1）可增加与Ran相连的GDP转化成GTP，RCC1通过组蛋白H2A/2B和染色体的周围产生较高浓度的RanGTP。Ran本身的GTPase活性较低，但可被位于核孔胞质面的RanGAP1激活，使GTPase活性增加10倍。RanBP1是一种分子量为23kDa的蛋白质，本身没有GAP活性，但它可以作为GEF抑制剂降低RCC1的活性，从而间接提高GDP和GTP的比值。Ran在真核细胞的一系列生物过程种，如DNA复制，RNA的转录和加工，RNA和蛋白质从核孔复合物的转运，有丝分裂和减数分裂的控制，尤其是纺锤体的组装，染色体的正确分配，核膜破裂和重组等方面，都有一定的作用。Ran基因广泛存在于动植物之中，我们一般将动物中的Ran基因叫作Ran，而植物中Ran有多种，如拟南芥共有三种（At?Ran?13），Ran2是拟南芥Ran基因之一。Ran是一种大量分布于细胞核内的GTP酶,是Ras类原癌基因大家族中的一员。?

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二、Ran的功能及研究?

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（一）GTP酶活性的功能?

Ran的调节蛋白可增强核苷酸交换和水解的速率，使Ran循环于GTP结合态(活性态)和GDP结合态(非活性态)，Ran-GTP酶循环主要受Ran的鸟苷酸交换因子(RanGEF)RCC1(regulator?of?chromosome?condensation-1)和GTP酶激活蛋白GAP1(GTPase-activating?protEin-1，酵母的同源物为RAN1)的调控。RanGTP/GDP的转换与循环在有丝分裂期向间期转变时，微管结构与核组装二者协调变化中起着重要作用。分裂间期RCC1在核中，通过组蛋白H2A和H2B与染色质结合。RCC1与H2A或H2B的结合激活RCC1的转换活性，使Ran-GDP转换为Ran-GTP。而RanGAP1在胞质中激活Ran使GTP水解，形成Ran-GDP。Ran结合蛋白1(RanBP?1)与Ran-GTP有高亲和力，可作为RanGAP?1的协同因子，提高RanGAP?1介导的Ran-GTP水解速率。Ran的核苷酸转换和水解的固有效率较慢，RCC1和RanGAPl可使Ran的核苷酸转换和水解的效率大大加快。?

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（二）核质转运的调控功能?

真核细胞中的核膜将核质与胞质分隔开，两者大分子物质（大于40－60ku）的流动、交换大多数是以主动运输的形式穿过NPC?(nuclear?pore?complex)。大分子的蛋白质和RNA的内输和外运分别由核定位信号(nuclear?localization?signal,?NLS)和核外输信号(nuclear?export?signal,?NES)的短肽所介导。

内输蛋白α/β(importinβ)家族成员在蛋白质或RNA的内输/外运过程中作为受体。内输蛋白α(importin?a)能够识别富含赖氨酸的NLS，再连接到importinβ上的IβB(importinβbinding)区形成三聚体复合物。该复合体通过importinβ和NPC蛋白的相互作用停靠在NPC上，接着通过NPC运输入核。?

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（三）核膜装配的调控功能?

Ran对核膜装配起着重要调控作用。在细胞分裂早期，Ran离开染色质，分散到细胞质中，其中一部分定位在纺锤体和中心粒上；在细胞分裂后期和未期，随着核膜的重新装配