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葡萄VvERF3b基因和VvPDF1.2基因的启动子功能

分析

引言

植物基因的启动子是调控外显子转录和基因表达的重要元素。许多

植物基因启动子已被分离并用于遗传工程和转录调控研究。然而，对于

葡萄基因的启动子功能研究相对较少。在本研究中，我们将对葡萄

VvERF3b基因和VvPDF1.2基因的启动子功能进行分析。

VvERF3b基因启动子功能分析

VvERF3b基因编码的是一个乙烯反应因子（ERF），该基因在葡萄

果实发育和抗逆应答中起重要作用。我们从基因组DNA中分离了

VvERF3b基因的启动子区域，并构建了一个转录报告质粒（pGTL-

ERF3b），其中包含了启动子区域和GUS基因。随后将该质粒转化至拟

南芥和葡萄悬浮细胞中，通过酶活检测方法来检测GUS基因的表达情况。

结果表明，VvERF3b基因启动子驱动的GUS基因在拟南芥幼苗的叶

片、根部和花器官中都有表达；同时，在葡萄悬浮细胞中也有表达。而

且，VvERF3b基因启动子响应外源乙烯的处理，并在乙烯响应元件（ERE）

的存在下表现出明显的启动子活性增强效应。这些结果表明VvERF3b基

因启动子在拟南芥和葡萄中都具有表达和响应乙烯的能力，并且乙烯响

应元件可能参与了该启动子的调控。

VvPDF1.2基因启动子功能分析

VvPDF1.2基因编码的是一种抗真菌蛋白，该基因被广泛应用于葡萄

栽培和真菌病害防治。为了探究VvPDF1.2基因启动子的功能，我们从基

因组DNA中分离了其启动子区域，并分别构建了pGTL-PDF1.2和pGTL-

PDF1.2-Δ5两个转录报告质粒。其中，pGTL-PDF1.2包含完整的启动子

区域和GUS基因，而pGTL-PDF1.2-Δ5则剪切了5端的22个碱基对启动

子区域进行了缩短。

通过转化拟南芥幼苗和葡萄悬浮细胞，并检测GUS基因的表达情况，

我们发现pGTL-PDF1.2驱动的GUS基因在拟南芥和葡萄中都有表达。而

对于pGTL-PDF1.2-Δ5，其启动子活性在拟南芥中明显降低，但在葡萄中

没有明显变化。这表明VvPDF1.2基因的启动子活性可能在不同物种或不

同组织中有差异。

此外，我们还发现，VvPDF1.2基因启动子在拟南芥中响应真菌侵染

和营养缺乏的处理，而在葡萄中则响应逆境胁迫和外源乙烯等处理。这

表明VvPDF1.2基因启动子可能参与了多种胁迫逆境响应途径的调控。

结论

本研究通过分析葡萄VvERF3b基因和VvPDF1.2基因的启动子功能，

发现在拟南芥和葡萄中均具有表达能力。对于VvERF3b基因的启动子，

我们还发现乙烯响应元件可能参与了其调控。而对于VvPDF1.2基因的启

动子，我们发现其在不同物种或不同组织中的启动子活性有差异，并参

与了多种逆境响应途径的调控。这些结果为进一步研究葡萄基因的启动

子调控机制和应用提供了参考。