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第五章
发酵过程及控制;学习目标;第一节发酵方式;固态发酵;深层培养;二、分批发酵;分批培养中的微生物的典型生长曲线;停滞期(Ⅰ);菌龄相同的菌种,则接种量越大,停滞期越短,而培养基的浓度对停滞期的长短影响不大。
停滞期的长短,差别很大,短的几乎觉察不到,瞬间即可完成,而长的要在接种后2~3天才开始生长。
种子一般应采用对数生长期且达到一定浓度的培养物,该种子能耐受含高渗化合物和低CO2分压的培养基。
工业生产中从发酵产率和发酵指数以及避免染菌考虑,希望尽量缩短适应期。;加速期(Ⅱ);指数生长期(Ⅲ);减速期(Ⅳ);静止期(V);死亡期(VI);重要的生长参数;比生长速率μ;分批发酵的优缺点;三、补料(流加)分批发酵;四、半连续发酵;五、连续发酵;连续培养中存在的问题;六、灌注培养;第二节发酵动力学;二、微生物生长动力学;;三、产物形成动力学;四、生长得率与产物得率;2.理论得率与表观得率;3.生长得率的其他表示方法;第三节发酵过程主要影响因素及其控制;主要的控制参数;种子质量;;温度控制;二、发酵热的测量及计算
发酵热的测定可采用以下几种方法:
①利用热交换原理,测量一定时间内冷却水的流量和冷却水进出口温度,根据
Q发酵=qvC(t2–t1)/V;
qv为冷却水体积流量,L/h;C为水的比热容,kJ/kg℃;V为发酵液体积,m3;②利用温度变化率:先使罐温恒定,再关闭自控装置,测量温度随时间上升的速率,根据
Q发酵=(M1C1+M2C2)V;
M1:发酵液质量kgM2:发酵罐质量kg
C1发酵液的比热容,kJ/kg℃C2发酵罐的比热容,kJ/kg℃
V为温度上升速率℃/h
③热力学方法:
;三、温度对微生物生长的影响
不同微生物的生长对温度的要求不同,根据它们对温度的要求大致可分为四类:
嗜冷菌适应于0~26℃生长,嗜温菌适应于15~43℃生长,嗜热菌适应于37~65℃生长,嗜高温菌适应于65℃以上生长
;影响酶的活性、影响细胞内各种反应速度;
最低生长温度、最高生长温度、最适生长温度;
在最适范围内生长速度随温度升高而增加,生长周期缩短;
不同生长阶段的微生物对温度的反应不同。
;四、温度对发酵的影响
1、影响反应速度;2、温度影响酶系的组成及酶的特性;3、温度影响发酵的方向
四环素产生菌金色链霉菌同时产生金霉素和四环素,当温度低于30℃时,这种菌合成金霉素能力较强;温度提高,合成四环素的比例也提高,温度达到35℃时,金霉素的合成几乎停止,只产生四环素。
4、温度还影响基质溶解度
在发酵液中的溶解度也影响菌对某些基质的分解吸收。因此对发酵过程中的温度要严格控制。;五、最适温度的控制
1、根据菌种及生长阶段来选择
微生物种类不同,所具有的酶系及其性质不同,所要求的温度范围也不同。
黑曲霉生长温度为37℃,
谷氨酸产生菌棒状杆菌的生长温度为30~32℃,
青霉菌生长温度为30℃。;2、根据培养条件选择
温度选择还要根据培养条件综合考虑,灵活选择。
通气条件差时可适当降低温度,使菌呼吸速率降低些,溶氧浓度也可髙些。
培养基稀薄时,温度也该低些。因为温度高营养利用快,会使菌过早自溶。;3、根据菌生长情况
菌生长快,维持在较高温度时间要短些;菌生长慢,维持较高温度时间可长些。培养条件适宜,如营养丰富,通气能满足,那么前期温度可髙些,以利于菌的生长。
总的来说,温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度;例子:利用热冲击处理技术来提高甘油的产量;实验:甘油发酵是在髙渗透压环境中进行的,因此可望通过热冲击来提高发酵甘油的产量
正交条件A冲击温度(℃)40,45,50
B开始时机(h)8,16,30
C冲击时间(分)15,30,60
结果发酵16小时,45℃冲击30分钟最佳,发酵96小时后甘油浓度提高32.6%,
(A)16h,45℃,30min
(B)12h,45℃,30min
;溶解氧浓度对发酵的影响及其监控;pH值的控制;pH对微生物生长繁殖和代谢产物形成影响的主要原因
1、影响原生质膜的性质
2、影响酶的活性
3、影响营养物质和中间代谢产物的解离;二、影响pH值变化的因素
1、基质代谢
(1)糖代谢特别是快速利用的糖,分解成小分子酸、醇,使pH下降。糖缺乏,pH上
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