葡萄糖氧化酶在单胃动物减抗中的应用及制剂工艺改进初探.docx

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葡萄糖氧化酶在单胃动物减抗中的应用及制剂工艺改进初探

葡萄糖氧化酶(Glucoseoxidase,E.C.1.1.3.4,GOD),又称为β-D-葡萄糖氧化还原酶,是用金黄色青霉菌进行深层通风发酵,精制而得。用点青霉和黑曲霉也可以制得。葡萄糖氧化酶广泛用于葡萄酒、啤酒、果汁等食品脱氧、面粉改良、防止食品褐变等方面,在食品快速检测及生物传感器上也广泛应用。由于微生物生长繁殖快、来源广,是生产GOD的主要来源,主要生产菌株为黑曲霉和青霉。

1GOD的抗氧化作用机制

GOD在有氧条件下能专一性地催化β-D-葡糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,消耗分子氧或原子氧氧化葡萄糖,保护食品中的易氧化成分。按反应条件GOD催化反应有3种形式;

(1)没有过氧化氢酶存在时,每氧化1mol葡萄糖消耗1mol氧;

(2)有过氧化氢酶存在时,每氧化1mol葡萄糖消耗1/2mol氧;

(3)有乙醇及过氧化氢酶存在时,过氧化氢酶可用于乙醇的氧化,每氧化1mol葡萄糖消耗1mol氧;

GOD对β-D-葡萄糖表现出强烈的特异性,葡萄糖分子C(1)上的羟基对酶的催化活性至关重要,且羟基处于β位时的活性要比在α位时高约160倍。葡萄糖氧化酶对L-葡萄糖和2-O-甲基-D-葡糖则完全没有活性。

2GOD的酶学性质

高纯度GOD为淡黄色晶体,易溶于水,可制成液体制剂。GOD完全不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有机溶剂。GOD相对分子质量在1.5×105左右,含2分子黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。pH作用范围3.5~6.5,最适pH5.0左右,在没有保护剂存在的条件下pH>8.0或pH<3.0时会迅速失活。GOD的作用温度范围为30~60℃。固体酶制剂在0℃下至少可保存2年,-15℃下可保存8年。

3葡萄糖氧化酶(GOD)对动物的有益作用

3.1清除分子氧应用于动物时酶(GOD)的催化作用是使消化道内分子氧减少,有利于肠道厌氧环境的维持,促进厌氧有益菌的生长。

3.2酸化作用胃肠道的pH会影响蛋白酶原转化为蛋白酶的过程及消化酶的活性,进而影响饲粮的消化率。葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖生成的产物葡萄糖醛酸(GA)是一种有机弱酸,可作为益生元改变肠道菌群,其经微生物继续发酵产生的乙酸、丁酸等短链脂肪酸(SCFA)可以进一步降低肠道pH;葡萄糖醛酸(GA)在体外系统中可调节盲肠菌群,增加SCFA的产生,降低氨的浓度。

3.3体外试验证明葡萄糖氧化酶(GOD)对多种致病细菌、真菌都有抑菌作用。且对一些植物病原菌引起的植物病害也有预防和治疗效果。该抑菌原理主要是依靠催化反应产生的过氧化氢完成,通过引起细胞质过氧化、干扰细胞内电子传递系统、破坏蛋白质分子结构或损伤遗传物质等方式影响细菌和真菌的正常生理功能。

3.4葡萄糖氧化酶(GOD)在动物养殖中的应用效果

3.4.1改善生产性能在断奶仔猪、哺乳母猪、肉鸡、肉鸭日粮中添加60~200U/kg的葡萄糖氧化酶(GOD)可以提高动物的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI),料重比(F/G)进而提高整体的饲料转化率。同时改善肉禽肉质。

3.4.2改善繁殖性能李嘉辉等研究表明产蛋后期蛋种鸡饲料添加350~500mg/kg葡萄糖氧化酶(GOD)后,产蛋率、种蛋蛋壳厚度和哈氏单位显著增加,料蛋比显著降低;孙颖雪、Sun等研究表明葡萄糖氧化酶(GOD)可以提高妊娠母猪后期平均采食量(ADFI)以及断奶7d发情率,降低母猪泌乳期背膘损失,并显著提高断奶时仔猪窝重。

3.4.3改善机体免疫水平饲料中添加适宜剂量的葡萄糖氧化酶(GOD)可以改变动物的免疫器官指数、血或肠道中细胞因子(IFN-α、γ干扰素、IL-2白细胞介素)和抗体的含量或表达水平,由此改善机体的免疫水平。

3.4.4改善肠道健康葡萄糖氧化酶(GOD)可以改善肠道屏障功能,促进受损的肠绒毛修复,进而改善肠道形态;通过产生厌氧环境抑制有害菌繁殖,维持肠道菌群平衡。

添加葡萄糖氧化酶(GOD)还可以改善动物抗氧化能力,缓解热应激、缓解动物霉菌毒素中毒;陈成等的研究表明断奶仔猪饲料中添加30mg/kg活性为1000U/g的葡萄糖氧化酶(GOD)可以替代3000mg/kg氧化锌,经济效益显著,且完全避免了锌对环境的污染。

尽管葡萄糖氧化酶(GOD)对动物具有以上诸多的有益效果,但酶活性在没有保护剂存在的条件下,pH>8.0或pH<3.0时会迅速失活。而单胃动物如体重30kg以上的育肥猪、成年母猪、2月龄以上的肉鸡、肉鸭,产蛋鸡等多种畜禽的胃液pH值均在3以下。其中成年猪胃液pH值大多在1~2,2月龄以上肉禽、

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