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本章重点

1、蛋白质的概念、功能、分类、元素组成及水解特点；

2、常见氨基酸的结构与分类、理化性质，如构型与旋光性、酸碱性与等电点的计算、光吸

收现象及原因、化学反应（丹黄酰氯、DNFB、苯异硫氰酸酯、茚三酮反应），氨基酸的分

离分析（电泳、离子交换层析、分配层析法）；

3、肽、肽键、肽平面的概念，肽的性质（特别注意两性电离）及生物活性肽；

4、蛋白质的结构：

A一级结构的定义、作用力、测序方法和意义（镰刀型细胞贫血症）

B二级结构的定义、作用力、类型（参数）及应用（角蛋白、丝心蛋白和胶原蛋白）

C超二级结构和结构域（了解）

D三级结构定义、特征及作用力

E四级结构定义及形成意义

5、蛋白质结构与功能的关系（肌红蛋白与血红蛋白为例）；

6、蛋白质的理化性质：酸碱性、胶体性质、沉淀反应、蛋白质的紫外吸收与呈色反应、变

性与复性；

7、蛋白质分子量的测定方法（SDS，分子筛层析）

8、蛋白质分离提纯的相关技术

蛋白质测序的步骤：

（1）获得足量、纯度较高的蛋白质样品，通过末端分析测定该蛋白质是由几条肽链组成；

（2）若已知蛋白质分子中存在的二硫键，必须拆开二硫键，获得伸展肽链

（3）对蛋白质多肽链进行氨基酸组成分析，分析各多肽链组成和各种氨基酸的摩尔数；

（4）用两种以上方法对蛋白质多肽链进行部分水解，产生大小不同、适合做顺序分析的肽

碎片。

（5）测定肽碎片的氨基酸顺序—Edman降解

（6）比较两套肽碎片的氨基酸顺序，推导整个肽链完整的顺序，并确定二硫键位置。

非常注意：某些蛋白质（含量少或不易分离），有时候只能通过测定基因序列来推断蛋白质

中氨基酸排列顺序的方法

蛋白质分离的一般原则：

研究蛋白质的结构、性质和功能，首先需要得到纯的蛋白质样品。

(1)蛋白质来源：微生物细胞、动物细胞和植物细胞；

(2)随时测定蛋白质活性并检测蛋白质含量。

(3)分离和纯化过程都必须在温和的条件下进行。

蛋白质的分离方法：

(1)生物组织的机械破碎。常用的方法有研磨法、超声波法、冻融法和酶解法等。

(2)根据蛋白质的特性，选择不同的溶剂进行抽提。如：水溶性蛋白用中性缓冲溶液抽提，

酸性蛋白用稀碱性溶液抽提，脂溶性蛋白用表面活性剂抽提等。

(3)粗提:离心除去固体杂质后，可通过沉淀法、超滤法、萃取法等处理，得到蛋白质粗制品。

(4)精制：可用层析法、电泳法等进行精制。

(5)成品加工：测定蛋白质的性质并干燥成成品。

氨基酸的分配层析原理

氨基酸的分配层析原理

两种物质的分溶曲线

一、名词解释

1、蛋白质的等电点

当蛋白质溶液处于某一PH值时，其分子解离成正负离子的趋势相等成为兼性离子，

此时该溶液PH值称为该蛋白质的等电点。

2.变性

在某些理化因素作用下，使蛋白质严格的空间结构受到破坏，从而引起蛋白质若干理化

和生物学性质的改变，称为蛋白质的变性。

3.蛋白质的四级结构

许多蛋白质分子是由两个或两个以上具有三级结构的多肽链组成的。这些多肽链借次

级键缔合在一起，蛋白质分子的这种结构形式称为蛋白质分子的四级结构。

蛋白质具有两性电离性质,大多数蛋白质在酸性溶液中带___正____电荷,在碱性溶

液中带___负____电荷。当蛋白质处在某一PH值溶液中时，它所带的正负电荷数相等，此

时的蛋白质成为___兼性离子______，该溶液PH称为该蛋白质

的______等电点____。

在蛋白质分子中,一个氨基酸的α碳原子上的_羧基____与另一个α氨基酸碳原子上

的___氨基____脱去一分子水形成的键叫__肽键______,它是蛋白质分子中的基本结构键。

3.维持蛋白质一级结构的化学键是__肽键____,而维持蛋白质高级结构的化学键是

__次级键___,主要的有__氢键____,__盐键___,__范德华力_____,__二硫键____,___

疏水键__。

4、蛋白质颗粒表面的__电荷____和___水化膜____是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。

5、常用的蛋白质沉淀法有盐析法、有机溶剂沉淀、酸类、重金属盐，其中盐析

和低温有机溶剂法沉淀，可保持蛋白质不变性。

6、蛋白变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种___次级_____键，使天然

蛋白质原有的__物理化学_____与__生化____性质改变。

三、问答题：

1.人的头发每年以15至20