T∕CVMA 163-2024 动物分枝杆菌多重荧光熔解曲线检测方法.pdfVIP

ICS11.220

CCSB41

团体标准

T/CVMA163—2024

动物分枝杆菌多重荧光熔解曲线检测方法

Mutiplexfluresencemeltingcurveanalysisfordetectionofmycobactrium

inanimals

2024-5-23发布2024-5-23实施

中国兽医协会发布

T/CVMA163—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国兽医协会提出并归口。

本文件起草单位：中国动物疫病预防控制中心、上海市动物疫病预防控制中心、中国动物卫生与流

行病学中心、厦门大学、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站、厦门致善生物科技股份有限公司。

本文件主要起草人：孙雨、范玉凤、李庆阁、许晔、梁斌、魏巍、寇占英、张存瑞、樊晓旭、李岩、

张旭、剡文亮、宋娜杰、石文志、莫莎、戴丽丽。

I

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动物分枝杆菌多重荧光熔解曲线检测方法

1范围

本文件规定了动物分枝杆菌多重荧光熔解曲线检测方法的检测试剂、仪器设备、实验操作步骤。

本文件适用于动物组织、分泌物、血液、粪便和培养物中分枝杆菌的核酸检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T18645动物结核病诊断技术

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4符号和缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleicacid）

EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamineTetraaceticAcid）

ITS：内转录间隔区（InternalTranscribedSpacer）

PBS：磷酸盐缓冲液（Phosphatebuffersaline）

PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）

Tm值：在热变性过程中，随着温度的逐渐升高，探针逐渐从靶序列上脱落，其双链解链到一半时

所对应的温度称为他们的熔解温度（MeltingTemperature）

UNG：尿嘧啶DNA糖基化酶（UracilN-Glycosylase）

5试剂和耗材

5.1试剂

5.1.1除特别说明以外，本文件所用试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682中二级水的要求，

所有试剂均用无核酸酶的容器分装。

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5.1.2蒸馏水或灭菌双蒸水：常温保存。按照GB/T6682要求进行。

5.1.375%乙醇：可购买，或者用无