诊断酶学第五版.ppt

（一）测定原理（二）免疫化学测定的优缺点优点主要有：①灵敏度高②特异性高③能用于一些不表现酶活性的酶蛋白④特别适用于同工酶的测定局限性主要有：①制备足够量的提纯酶作为抗原和具有免疫化学性质的抗血清较困难②测定步骤多，操作繁琐③测定成本高二、酶质量测定第32页,共55页，星期六，2024年，5月三、同工酶检测第33页,共55页，星期六，2024年，5月(一)电泳法---琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、毛细管电泳●用电泳法进行同工酶分析时，如显示的区带数与同工酶数不一致时，要特别注意巨分子酶的存在。(二)层析法第34页,共55页，星期六，2024年，5月血清LD电泳图谱分析第35页,共55页，星期六，2024年，5月正常和病理状况时血清CK同工酶谱第36页,共55页，星期六，2024年，5月(三)免疫分析法免疫抑制法利用同工酶的一种亚基与相应的抗体结合后，酶活性受到抑制，测定加与不加抗体前后样品中酶活性的变化，可以计算出该型同工酶的活性。不加抗CK-MM血清时样品的CK活性：CK-MM和CK-MB活性；加入抗CK-MM血清时样品的CK活性：50％CK-MB的活性；加入抗CK-MM血清时样品的CK活性×2：CK-MB活性；所测CK-MM和CK-MB之总活性－CK-MB活性＝CK-MM活性。第37页,共55页，星期六，2024年，5月(四)动力学分析法1．底物特异性分析法2．抑制剂分析法3．pH分析法4．热失活分析法(五)蛋白酶水解法第38页,共55页，星期六，2024年，5月第三节常用酶及同工酶测定的临床应用一、血清酶血清酶活性升高的原因：●组织器官受损造成细胞破坏或细胞膜通透性增高，细胞内的某些酶大量释放入血；●细胞的转换率增高或细胞的增殖加快，其特异的标志酶释放入血；●细胞内酶的合成或诱导增强；●酶的清除受阻。第39页,共55页，星期六，2024年，5月1、血清酶的来源（1）血浆特异酶（2）非血浆特异酶①外分泌酶②细胞酶2、血清酶的去路（1）血清酶的半寿期（2）血清酶的失活和排泄（一）血清酶的来源与去路第40页,共55页，星期六，2024年，5月（二）血清酶的生理差异1．性别2．年龄3．进食4．运动5．妊娠6．其他第41页,共55页，星期六，2024年，5月常用的酶谱：(1)心肌酶谱---AST、LD、CK、CK-MB、CK-MB亚型或CK-MM亚型(2)肌酶谱---LD、AST及其同工酶、CK-MM亚型(3)肝酶谱---ALT、LD、γ-GT、ALP、ChE、MAO(4)肿瘤酶谱---ACP及其同工酶、ALP及其同工酶、γ-GT及其同工酶、AFU、AMY及其同工酶、LPS(5)胰酶谱---AMY及其同工酶、LPS、弹力蛋白酶-1、磷脂酶A2（三）血清酶的临床应用第42页,共55页，星期六，2024年，5月第43页,共55页，星期六，2024年，5月二、尿液酶三、浆膜腔积液酶四、脑脊液酶第44页,共55页，星期六，2024年，5月五、同工酶的诊断价值LD同工酶——心肌梗死、肝功能损伤和恶性肿瘤CK同工酶——心肌梗死、肌肉疾病和神经系统疾病AST同工酶——肝脏、心肌等细胞损伤程度的判断GP同工酶——急性心肌梗死ARS同工酶——膀胱癌ALD同工酶——肝脏疾病、心肌梗死、神经肌肉系统疾病和恶性肿瘤γ-GT同工酶——肝脏占位性病变AMS同工酶——急性胰腺炎、腮腺炎ALP同工酶——肝胆疾病、骨骼疾病ACP同工酶——前列腺疾病GST同工酶——肝脏疾病、肺癌第45页,共55页，星期六，2024年，5月1、转氨酶及其同工酶DeRitis比值（AS