人骨形成蛋白2和7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建的开题报告.pdfVIP

人骨形成蛋白2和7成熟肽编码区基因克隆和真核

表达载体的构建的开题报告

一、背景和意义：

人骨骨质疏松症(osteoporosis)是一种常见的骨骼代谢疾病，主要表

现为骨钙流失和骨微结构发生改变等，是老年人常见的疾病之一。人骨

形成蛋白2(bonemorphogenicprotein2,BMP-2)和7(bonemorphogenic

protein7,BMP-7)是一类重要的信号蛋白，它们与骨形成密切相关，具有

促进成骨细胞生长和分化，促进骨基质蛋白合成等作用。因此，BMP-2

和BMP-7在治疗骨缺损、骨折愈合等方面应用前景广阔。

本次课题拟利用基因克隆和真核表达技术成功构建人BMP-2和

BMP-7的编码区基因克隆和真核表达载体，为下一步对BMP-2和BMP-7

功能的研究和用于治疗骨缺损等骨代谢相关疾病的研究提供有力的工具。

二、研究内容和方法：

1.基因克隆

从人体骨细胞中抽取BMP-2和BMP-7编码区的基因，利用PCR扩

增技术进行扩增，然后将扩增产物分别连接到真核表达载体上，构建出

BMP-2和BMP-7的基因克隆载体。

2.真核表达

使用真核表达载体将BMP-2和BMP-7基因转染到体外培养的哺乳动

物细胞中，利用Westernblot和ELISA等技术检测表达蛋白的产量和纯

度，并进行功能鉴定。

三、预期结果和意义：

预计通过本次研究，能够成功构建出BMP-2和BMP-7编码区基因克

隆和真核表达载体，为进一步研究其功能和应用于治疗骨缺损等骨代谢

相关疾病提供基础。同时，该研究将为开发新型治疗骨质疏松症的药物

提供有力支持。