马铃薯抗黑胫病鉴定评价技术规程.pdf

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15

内蒙古自治区地方标准

DB15/TXXXX—XXXX

马铃薯抗黑胫病鉴定评价技术规程

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（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

  发布

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。

本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古师范大学。

本文件主要起草人：李正男、孙平平、张磊、张斌。

I

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马铃薯抗黑胫病鉴定评价技术规程

1范围

本文件规定了马铃薯抗黑胫病的鉴定的术语和定义、培养基、接种体制备、接种、病情调查和抗病

性评价等内容。

本文件适用于内蒙古地区马铃薯品种在室内条件下对黑胫病抗性水平的鉴定。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

马铃薯黑胫病Potatoblackleg

马铃薯黑胫病是由果胶杆菌属（Pectobacteriumsp.）、欧文氏菌(Erwiniacarotovora)引起的

细菌性病害。病原菌可以通过伤口直接侵染，还可以通过灌水、昆虫、土壤等传播。感病植株的茎基变

黑，严重时呈水渍状腐烂，逐渐扩展到茎上部，引起叶片出现卷曲皱缩、褪绿黄化等现象，最终茎秆腐

烂，植株全部枯死。

4培养基

LBA培养基：5g酵母提取物，10g胰蛋白胨，10gNaCl，15g琼脂粉，1000mL去离子水,121℃灭

菌15min。

LB液体培养基：不加琼脂粉，其余同LBA

5接种体制备

病原物分离

从发病马铃薯植株的发病部位采用组织分离结合单菌落分离病原物，分离物经形态学、生理生化特

性和分子序列鉴定为马铃薯黑胫病病原菌，经柯赫氏法则验证其致病性后保存备用。

菌悬液的配置

取100μl在-80℃保存的分离病原菌涂抹于LBA固体培养基上，28℃复壮48h。挑取菌落于100mLLB

液体培养基中，28℃、180r/min培养48h，用平板计数法调节菌悬液浓度至10cfu/mL。6

6接种

温室盆栽茎杆注射接种法

1

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6.1.1马铃薯准备

每个马铃薯品种选择形态完好、无明显伤病的马铃薯种薯种植在容积4L、装有无菌的细沙与腐殖

土等量混匀的盆中，16h光照/8h黑暗条件下培养，湿度在70%，温度控制在25℃。采用随机区组排

列盆栽，待马铃薯植株长出高约7~8cm用于接种。

6.1.2接种

6

用无菌牙签戳伤植株的茎基部，移液枪吸取10μ