流式细胞仪原理及应用.ppt

正常人血液白细胞免疫表型散点图正常人血液细胞免疫表型T淋巴细胞：CD45++++、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+、CD5+/CD7+，部分细胞CD（16+56）+，无CD4+CD8+双阳性细胞B淋巴细胞：CD45++++、CD10-/CD19+、CD20+/CD22+、HLA-DR+/CD13-NK细胞：CD45++++、CD（16+56）+/CD3-单核细胞：CD45+++、HLA-DR+/CD13+、CD14+/CD33+中性粒细胞：CD45++、HLA-DR-/CD13+、CD14-/CD33+，CD13比CD33表达更高嗜酸性粒细胞：CD45+++、HLA-DR-/CD13+、CD14-/CD33+，CD13比CD33表达更高正常人骨髓有核细胞免疫表型散点图正常人骨髓细胞免疫表型淋巴细胞:CD45++++、CD34-/CD38+、CD5+/CD7+（T淋巴细胞）；CD10-/CD19＋（B淋巴细胞）单核细胞:CD45+++,CD34-/CD38+、HLA-DR+/CD13+、CD14+/CD33+、CD36+/GlyA-粒系细胞:原粒细胞CD45+、CD34+/CD38+、CD14-/CD33+、HLA-DR+/CD13+早幼粒细胞及其以下各阶段中性粒细胞：CD45++、CD34-/CD38+、CD14-/CD33+、HLA-DR-/CD13+，与原粒细胞或更幼稚细胞的表型有明显差异巨核细胞：CD45++、CD41+/CD61+幼红细胞：CD45-、CD36+/GlyA+AML免疫表型急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）

骨髓细胞免疫分型散点图BD公司流式细胞仪产品FACSVantageSE-大型分选机FACSAria-高速分选的台式机FACSDiva高速分选的数字化大型机贝克曼-库尔特公司流式细胞仪产品FC500全自动分析仪Gallios双激光6色EPICSALTRA分析分选系统AppliedBiosystems公司AttuneTM声波聚焦细胞分析仪流式细胞仪的应用细胞内和细胞外发生了什么事件？流式细胞仪的应用领域临床研究:血液、肿瘤、药理、免疫….生物学研究：遗传、生殖、微生物、细胞生物、毒理、分子生物、….环境研究：海洋生态研究….制药工业食品工业农业畜牧业流式细胞仪的临床应用HIV免疫分型，CD4绝对计数白血病和淋巴瘤的免疫分型肿瘤的细胞周期和倍体分析细胞移植的交叉配型和免疫状态监测干细胞计数残量白血病细胞检查HLA-B27检查血小板功能及相关疾病流式细胞仪的临床免疫学应用淋巴细胞免疫分型淋巴细胞亚群分析CD4绝对计数HIV与SARS的诊断与研究淋巴细胞CD4/CD8分析CD4绝对计数T细胞活化细胞移植的交叉配型和免疫状态监测免疫功能和免疫调控的研究淋巴细胞和单核细胞的活化细胞因子的研究淋巴细胞的增殖树突状细胞的研究HLA-B27检测淋巴细胞亚群分析淋巴细胞亚群分析使用经荧光素标记的特异单克隆抗体，进行多色染色，同时对淋巴细胞膜上多种白细胞分化抗原（CD分子）的表达进行分析，可以将淋巴细胞亚群区分开，并定性分析；淋巴细胞亚群的百分含量淋巴细胞亚群的绝对计数，进行定量分析临床意义了解在不同情况下体内免疫功能状态辅助临床疾病的诊断探索疾病的发病机理、病程、预后监测、指导临床治疗方案免疫系统疾病免疫缺陷病，AIDS移植病人排斥反应或移植物抗宿主反应的检测肿瘤病人化疗后免疫力检测淋巴细胞亚群分析根据功能，淋巴细胞主要分为B淋巴细胞（CD19+），与体液免疫有关T淋巴细胞（CD3+），与细胞免疫有关总T和总B可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病NK细胞（CD3-CD16+56+），行使免疫监控功能，?能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用。淋巴细胞亚群分析根据CD4、CD8表达，T淋巴细胞又分为T辅助/诱导细胞（CD3+CD4+）T抑制/细胞毒性细胞（CD3+CD8+）Th/Ts评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态，此外，这一比值还可用来监测骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻击Th/Ts升高：自身免疫性疾病（类风湿性关节炎、SLE）Th/Ts降低：病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血常见疾病的T淋巴细胞的变化：疾病CD4+CD8+CD4+/CD8+类风湿性关节炎?（活动期）