RNA的转录后加工分子生物学ppt课件.pptxVIP

1977年RobertJandSharpPA分别发现断裂基因（interruptedgene），1993年获得诺贝尔生理学和医学奖

当用RNA与其转录的模板DNA分子杂交时，RNA链取代DNA双链中对应的链，形成R-突环(R-loop);3.7.1RNA中的内含子;3.7.2tRNA前体的加工;真核生物tRNA基因的数目比原核生物tRNA基因的数目要大得多。

真核生物的tRNA也成簇排列，并且被间隔区所分开

真核生物tRNA前体的3‘端不含CCA序列，成熟tRNA3’端的CCA是后加上去的，由核苷酸转移酶催化此反应。

tRNA的修饰成分由特异的修饰酶所催化。真核生物的tRNA除含有修饰碱基外，还有2‘-O-甲基核糖，其含量约为核苷酸的百分之一。

有些tRNA还具有居间序列，需要进一步拼接;RNA的拼接共有4种方式：

核mRNA的拼接体的拼接(nuclearmRNAspliceosomalsplicing)

类型I自我拼接(groupIself-splicing)

类型II自我拼接(groupIIself-splicing)

核tRNA的酶促拼接（nucleartRNAenzymaticsplicing）;细胞内已发现的RNA剪接有3种（不包括tRNA的加工）。;hnRNA的拼接;此规则不适合于线粒体和叶绿体基因的内含子，也不适合于tRNA和rRNA的内含子;剪接的普遍性;剪接的特异性;pre-mRNA剪接的机制和套索结构;腺苷酸原来已有3’,5’-磷酸二酯键依然存在，加上此2’,5’-磷酸二酯键连接后，在腺苷酸处出现了一个套索。;RNA剪接由剪接体（splicesome）执行;ThesnRNPs在剪接中有3个功能：

识别5剪接位点和分支点;

把这2个位点集结到一起;

催化或协助催化剪接和连接反应。;U2AF(U2auxiliaryfactor),recognizesthe

polypyrimidine(Py)tract/3splicesite,;snRNApairingisimportantinsplicing;U1snRNPinitiatessplicing;U2pairswiththebranchsite;U6pairswiththe5’-splicingsite;西北农林科技大学郭泽坤;U4的释放，促进U6和U2配对;U5snRNPhelpstobringthetwoexonstogether;U2,U5,U6bringthereactiongroupclose;一个矛盾（paradox）;外显子遗漏;Thefirstguardmechanism;Thesecondguardmechanism;howdoesalternativesplicingoccursooften?

Thebasicansweristhatsomesplicesitesareusedonlysomeofthetime,leadingtotheproductionofdifferentversionsoftheRNAfromdifferenttranscriptsofthesamegene.

Alternativesplicingcanbeeitherconstitutiveorregulated.

Intheformercase,morethanoneproductisalwaysmadefromthetranscribedgene.

Inthecaseofregulatedsplicing,differentformsaregeneratedatdifferenttimes,underdifferentconditions,orindifferentcellortissuetypes.;正常情况;肌钙蛋白T;两种抗原的比例因剪接相关蛋白SF2/ASF的表达水平而不同。SF2/ASFisanSRprotein,whenabundant,thisproteindirectsthemachinerytofavoruseoftheclosest5splicesite.;AlternativeSplicingIsRegulatedbyActivatorsandRepressors;MostofactivatorsarerecognizedbySRprotein