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临床和实验医学杂志2008年2月第7卷第2期
靶向骨桥蛋白基因的RNA干扰对裸鼠肝癌影响
的实验研究
温敏杰朱光辉蔡文松李书华
(1广州医学院附属市一人民医院普外科;2广州医学院病理教研室广东广州510180)
【摘要】目的检测骨桥蛋白(OPN)的核糖核酸(RNA)干扰技术对裸鼠肝癌的影响作用,探讨RNA干扰对肝癌基因
治疗中的有效性和相关机制。方法体外化学合成骨桥蛋白序列特异性的短发夹RNA(shRNA)质粒载体,并导入肝癌
细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤,尾静脉注射OPNshRNA表达载体,观察其对肝癌生长的影响作用;酶联免疫吸附(ELISA)
方法检测OPN在肿瘤组织中的蛋白浓度。结果全身系统性给予OPNshRNA后,空载体组、阴性shRNA组及OPN
shRNA转染组肿瘤体积分别为235±5mm、222±24mm(P=0.2)、98±24mm(P<0.05);瘤组织中OPN浓度在空
载体组、阴性shRNA组及OPNshRNA转染组分别为498±8pg/mg、382±98pg/mg和122±56pg/mg(P<0.05)。结论
OPN的RNA干扰明显抑制了肿瘤的生长,有望通过RNA干扰技术实现肝癌的基因治疗。
【关键词】骨桥蛋白(OPN)肝癌核糖核酸
InfluenceofRNAinterferencetargetingOPNinthetreatmentofhepatoceHularcancerinnudemice.WENMin—fi,eZHUGuang—hui,
CA1Wen—song,ela1.1DepartmentofGeneralSurgery,GuangzhouFirstMunicipaPeople ̄Hospital;2InstituteofPathology,GuangzhouMedical
College,GuangzhouGuangdong510180,China、
【Abstract】0bjectiveTonviestigatetheefectivenessandinhibitorymechanismofRNAintefrerencetechnologyforhepatocellularcancergene
therapybynihibitingosteopontin(OPN)innudemice.MethodsModelofsubcutaneoustumorwasgeneratedbynjiectionofHepG2cellsintothe
dorsumofnudemice,OPNshRNAvectorwasinjectedfromthetailveinofthetumormodelmiceaftertumorcellinnocalation.Concentrationof
OPNintumorhomogenateswasdetectedbyELISAassay.Tumorgrowthwasobserved.ResultsTreatmentwithOPNshRNAinvivosuppressed
tumorgrowthat4weekswhencomparedtocontrols.Grosstumorvolumesofvectoronlygroup,controlshRNAgroupandOPNshRNAtransduced
groupwere235±5mm,222±24mm;and98±24mmrespectively(P<0.05).OPNELISAoftumorhomogenatesconfirmedRNAinterfer—
ence.OPNinvectoronlygroup,controlshRNAgroupandOPNshRNAtra
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