感染的检查与防治.pptVIP

第十章病原微生物感染的检查及防治原则第一节细菌感染的检查标本的采集和送检避免杂菌污染运送注意保存不同期不同标本用抗菌素以前采集病变明显部位标本必须新鲜一、细菌学诊断,病原菌的检查程序药物敏感试验直接涂片镜检分离培养生化试验血清学试验动物试验明确诊断初步诊断检测核酸（杂交、PCR、DNA指纹）其他检测技术（测抗原）（检测病原菌）原理二、血清学诊断双份血清标本,恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高≥4倍者方有意义种类标本凝集试验:沉淀试验:补体结合试验:中和试验:肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等梅毒VDRL、RPR试验等抗“O”试验等Q热柯克斯体抗体检测等将疫苗或类毒素接种于人体,使机体获得免疫力的一种防治微生物感染的措施。第二节细菌感染的免疫防治一、人工主动免疫主要生物制品死疫苗活疫苗类毒素亚单位疫苗DNA重组疫苗核酸疫苗治疗性疫苗抗毒素细胞免疫制剂二、人工被动免疫注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等免疫制剂,使机体获得特异性免疫力主要生物制品抗菌血清胎盘球蛋白丙种球蛋白区别要点人工主动免疫人工被动免疫免疫物质抗原抗体或细胞因子等免疫出现时间满，2~4周快，立即免疫维持时间长，数年~数月短，2~3周主要用途预防治疗或紧急预防比较区别点死疫苗活疫苗制剂特点死，强毒株活减毒株接种剂量与特点量较大，2~3次量较小，1次保存及有效期易保存，约1年不易保存，4℃数周免疫效果较低，维持数月~2年较高，维持3~5年甚至更长.第三节病毒感染的检查标本的采集与送检用于分离培养的标本:a、采集急性期标本b、采集感染部位标本c、冷藏血清学诊断的标本:急性期和恢复期双份血清，-20℃保存.一、检测活病毒病毒的分离培养与鉴定1.最常用细胞培养2.鸡胚接种:主要用于流感病毒的分离3.动物接种少用:主要用于狂犬病病毒乙型脑炎病毒的分离动物接种鸡胚接种组织培养器官培养移植培养细胞培养原代细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养一、检测活病毒（一）三大培养方法常用的细胞培养（二）病毒在细胞内增殖的指标1.CPE2.红细胞吸附正常细胞病变细胞狂犬病毒包涵体（Negribody）3.包涵体巨细胞病毒包涵体4.免疫技术（三）病毒数量和感染性测定1.蚀斑试验2.ID50或TCID50病毒感染鸡胚、动物或细胞后,引起50%发生死亡或病变的最小量。病毒感染单层细胞后,产生的局限性病灶,称蚀斑,蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称蚀斑形成单位,病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。病毒的快速诊断光镜-----包涵体电镜免疫荧光ELISA分子生物学技术杂交SouthernblotPCRNorthernblot.二、检测病毒抗原与抗体已知抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原已知抗原测血清中抗体测IgM,或动态测IgG（双份血清）三、检测病毒核酸PCR试验引物核酸杂交试验探针基因芯片技术第四节病毒感染的防治一、病毒感染的治疗（一）药物治疗1.核苷类药物2.蛋白酶抑制剂3.天然药物（二）基因治疗1.反义寡核脱氧核酸2.核酶（三）免疫治疗1.核苷类药物（1）抑制病毒基因复制碘尿苷(疱疹净)用异常嘧啶取代胸腺嘧啶,眼疱疹病毒感染。也可渗入细胞DNA,故有毒性。无环鸟苷(啊昔洛韦)，竞争病毒复制酶。（2）抑制病毒基因转录病毒唑2.蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”治疗HIV，3TC加蛋白酶抑制物3.天然药物中草药治疗:黄芪、板蓝根、大青叶（二）基因治疗1.反义寡核脱氧核酸(反义DNA)与病毒DNA关键基因互补反义寡核苷酸(反义RNA)与病毒RNA关键基因互补2.核酶与病毒RNA结合,切割降解靶RNA（三）免疫治疗细胞因子