ERF转录因子cDNA的分离及表达载体的构建的开题报告.pdfVIP

大白菜推定AP2/ERF转录因子cDNA的分离及表达

载体的构建的开题报告

尊敬的评委老师们，您们好！我是XXX，今天我将为大家介绍我课

题的开题报告。

一、研究背景和意义

植物的生长发育和逆境响应往往受到基因的调控，而AP2/ERF转录

因子是植物中重要的基因家族之一，参与植物的生长、发育和胁迫响应

等许多生理生化过程。目前，已经有一些大白菜AP2/ERF转录因子家族

成员被鉴定出来，但是还有很多尚未被报道。因此，本研究将着眼于大

白菜AP2/ERF转录因子家族的探索，有助于更全面地了解大白菜基因家

族的情况，有助于深入研究大白菜的生长发育以及逆境响应机制。

二、研究目标

本研究旨在筛选出大白菜AP2/ERF转录因子家族成员，分离其

cDNA并构建表达载体，利用蛋白质表达等技术进行分析，并探究其在大

白菜生长发育和逆境响应中的功能及作用机制。

三、研究内容和方法

(1)筛选出大白菜AP2/ERF转录因子家族成员。

利用大白菜EST数据库，选取AP2/ERF转录因子家族成员进行筛选，

采用序列比对和聚类分析等方法，并验证其确切性。

(2)分离大白菜AP2/ERF转录因子家族成员的cDNA。

根据PCR扩增结果，采用凝胶电泳等方法进行分离纯化。

(3)构建大白菜AP2/ERF转录因子家族成员的表达载体。

利用pET系统等表达载体，进行重组，将大白菜AP2/ERF转录因子

家族成员融合到载体上，进行接合和转化。

(4)蛋白质表达和分析。

利用大肠杆菌表达大白菜AP2/ERF转录因子家族成员并纯化，利用

WesternBlot等方法进行蛋白质表达分析，比较其与未处理样品的差异。

四、研究预期结果及其意义

(1)筛选出基因家族成员后，我们将能够对大白菜AP2/ERF转录因

子家族有更加全面的认识，并对大白菜基因家族的进一步研究打下基础。

(2)分离其cDNA并构建表达载体后，将有助于深入探究大白菜基因

家族的表达及调控机制，从而揭示其在大白菜的生长发育和逆境响应中

的作用和意义。

(3)蛋白质表达和分析将进一步验证大白菜AP2/ERF转录因子家族

成员在调控大白菜生长发育和逆境响应中的功能，从而有助于进行相关

功能基因筛选和基因工程改良。