铜绿假单胞菌实验活动风险评估报.doc

铜绿假单胞菌实验活动风险评估报告

一、生物学特性

(一)种类和细菌分型

铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌,在自然界分布广泛,为土壤中存在的最常见的细菌之各种水、空气,人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌的存在。本菌存在的重要条件是潮湿的环境。假单胞菌属根据其RNA/DNA的同源性可分为五个主要型,铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)是其代表菌种。本菌生长对营养要求不高。菌体O抗原有两种成分:一种为内毒素蛋白,是一种保护性抗原;另一种为酯多糖,具有特异性。根据其结构可将铜绿假单胞菌分成12个血清型,此外还可利用噬菌体或铜绿假单胞菌素分型。

(二)来源

铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa,当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成,意即虚假的单元,是早期微生物学用作描述病菌用的。而Aerug1nosa则是铜绿,即铜与空气中的氧气、二氧化碳和水等物质反应产生的物质,又称铜锈,化学式为Cu2(OH)2CO3,正好表达了这种细菌所产生的青色色素。绿脓素(Pyo-cynin)的生物合成是以群体效应来调控的,就像充满囊肿性纤维化病人肺部的铜绿假单胞菌的生物膜一样。

(三)传染性

铜绿假单胞菌是人体正常菌群之一,在肠道中繁殖,为环境中主要污染源之一,铜绿假单胞菌可由各种途径传播,但主要是通过污染医疗器具及带菌医护人员引起的医源性感染而传播的。

(四)传播途径

通过污染医疗器具及带菌医护人员引起医源性感染。感染多见于皮肤黏膜受损部位,如烧伤、创伤或手术切口等。感染部位与细菌的入口及病人的易感性有关。

(五)易感性

人类对铜绿假单胞菌没有天然免疫力,人群普遍易感。

(六)潜伏期

铜绿假单胞菌平均潜伏期为48h至72h。

(七)剂量一效应关系

铜绿假单胞菌是重要的医院内病原菌之一。在医院的洗涤槽、防腐溶液和贮尿容器中常可发现这种细菌,并可通过医护人员将病菌传给病人,特别是在灼伤和新生儿重症监护室。但目前尚未见有铜绿假单胞菌对人准确感染剂量的报道。

(八)致病性

绿脓假单胞菌在正常情况下不致病,当机体抵抗力低下时可致病,还可引起病人死亡。本菌为条件致病菌,该菌通常伴随毒力较强的细菌而存在于病灶中,但偶尔也可单独引起暴露于外部的组织感染。铜绿假单胞菌的主要致病物质是内毒素,此外尚有菌毛、荚膜、胞外酶和外毒素等多种致病因子。

(九)变异性

铜绿假单胞菌感染的治疗易产生耐药性,但没有找到耐药是铜绿假单胞菌变异引起的证据,但可以肯定细菌生物膜(Biofilm)在铜绿假单胞菌感染中广泛存在,是导致抗菌治疗失败的重要原因之一。

(十)环境中的稳定性

铜绿假单胞菌对外界环境的抵抗力较强,在潮湿处能长期生存,对紫外线不敏感,湿热55℃1h才被杀灭。

(十一)药物敏感性

治疗铜绿假单胞菌的临床感染,以复合青霉素类、三或四代头孢菌素、三或四代喹诺酮类等药物为好。有些菌株对磺胺、链霉素、氯霉素敏感,但极易产生耐药性。青霉素对此菌无效,但庆大霉素和多粘菌素B、E,氨基甙类、第三和第四代头孢菌素(头孢哌酮、头孢曲松、头孢匹罗、头孢唑南等,后两种为三线抗菌药物,应慎用)等抗生素作用较明显,一些半合成的青霉素类抗生素,比如阿洛西林和哌拉西林对绿脓杆菌也有很强的抗菌作用,其有效率约为80%,磷霉素对其也有效,但效果不如以上的抗生素。联合用药可减少耐药菌株的产生。

(十二)消毒剂敏感性

本菌对化学药物的抵抗力比一般革兰阴性菌强大。1:2000的氯己定、度米芬和新洁尔灭、1:5000的消毒净,5min内均可将其杀死。0.5%~1%醋酸也可迅速使其死亡,对多种化学消毒剂与抗生素有抗性或耐药性。

(十三)物理灭活

本菌的抵抗力较其他革兰阴性菌强,56℃需1h才可杀死该菌

(十四)在宿主体外存活

在生长过程中,本菌对营养的要求不高。对有正常菌群存在的临床标本或采自环境中的标本应接种选择性培养基,如麦康凯琼脂培养基(MAC);对无正常菌群存在的临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通或血琼脂培养基。在普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落。该菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合,将使得培养基呈亮绿色。在血琼脂平板上生长时,可以见到在菌落的周围有溶血环,菌落呈金属光泽;如果是在液体培养基中,则呈浑浊状生长,在液体表面形成菌落,而在培养基底部细菌的生长不良。

(十五)与其他生物和环境的交互作用

铜绿假单胞菌引起