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首例胚胎移植成功1890年首创动物组织体外培养法1907年发现哺乳动物精子获能现象1951年体细胞核移植成功1958年试管家兔诞生1959年创立单克隆抗体技术1975年胚胎分割移植成功1978年分离和培养小鼠胚胎干细胞1981年克隆羊多莉诞生1996年获得诱导多能干细胞2006年单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生2014年我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。2017年动物细胞工程的发展历程科技探索之路
第2节动物细胞工程动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞工程基础
从社会中来皮肤烧伤怎样才能获得大量的自体健康皮肤?通过动物细胞培养构建的人造皮肤可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。借助动物细胞培养构建人造皮肤
怎样才能获得大量的自体健康皮肤?到社会中去
1、概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。2、结果:获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体。3、原理:细胞增殖(有丝分裂)那么,动物细胞培养需要哪些条件呢?动物细胞培养动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件4、地位:动物细胞培养是动物细胞工程的基础
动物细胞培养所需的基本条件营养物质其他条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境体外培养动物细胞需要满足什么条件?一、动物细胞培养的条件
合作学习任务一:阅读教材P44,小组讨论回答以下问题:(1)动物细胞培养使用固体培养基or液体培养基?天然培养基or合成培养基?什么叫合成培养基?(2)如何维持无菌、无毒的环境?(3)适宜的温度、pH分别是多少?保持适宜的渗透压目的是什么?(4)所需气体主要包括?分别有什么作用?如何保持该气体环境?
葡萄糖氨基酸无机盐维生素1、营养条件【思考】:培养基的类型:固体培养基or液体培养基合成培养基or天然培养基将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基?动物血清一、动物细胞培养的条件(1)培养基的构成:合成培养基+血清等天然成分血清由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚。血清可以补充合成培养基中缺乏的物质,如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。(2)培养动物细胞一般使用液体培养基,也称培养液。有利于培养的细胞与营养物质充分接触
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作③培养液需要定期更换目的:以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害无菌2、无菌、无毒的环境如何维持无菌、无毒的环境?另外:可适量添加抗生素,防止细菌等微生物污染无毒一、动物细胞培养的条件
小知识动物和人体的免疫系统可抵御各种微生物对机体的入侵,因此体内细胞生活的内环境几乎是无菌、无毒的。而离体培养的细胞对微生物和有毒物质的防御能力极低,所以其培养环境中一旦有细菌、真菌或病毒等微生物的污染,培养的细胞就会死亡。所以,进行动物细胞培养时,需要创造无菌、无毒环境,有时需要在培养液中加入抗生素,从而抑制细菌等微生物生长。选择抗生素要注意种类和剂量,以保证抗生素对培养的细胞无害。动物细胞培养需要无菌、无毒环境的原因:
3、温度、pH和渗透压①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以______________为宜;36.5±0.5℃②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为___________7.2-7.4③适宜的渗透压:维持细胞正常的形态和功能人体内环境的理化性质①人体细胞外液的温度一般维持在:36.5±0.5℃②正常人的血浆近中性,pH约为:7.35~7.45③渗透压:指溶液中溶质微粒对水的吸引力。在37℃时,人的血浆渗透压约为:770kPa一般与相应动物内环境的理化性质保持一致。一、动物细胞培养的条件
(1)气体组成及作用:O2:CO2:细胞代谢所必需,维持细胞有氧呼吸维持培养液的pH(2)具体操作:通常采用培养皿或松盖培养瓶。置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。CO2培养箱培养皿培养瓶4、气体环境一、动物细胞培养的条件
动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件二、动物细胞培养的过程任务二:阅读教材P44~45文字与图2-12,小组讨论完成以下问题:(1)根据概念与图2-12,用关键词和箭头构建动物细胞培养的流程。(2)动物组织取材于幼龄动物or老龄动物?为什么?(3)培养前,为什么要将动物组织分散成单个细胞?(4)用什么方法将动物组织分散成单个细胞?
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