研究生讲课肿瘤干细胞.pptVIP

免疫荧光基本原理流式细胞仪的工作原理流式细胞仪细胞生物学01肿瘤些02免疫学03血液学04药物学05流式细胞仪的应用流式细胞结果分析（散点图）流式细胞分析肺癌干细胞的分离鉴定原代肺癌细胞培养CULTURING:SerumfreemediumDIGESTION:-CollagenaseI37oC-2hours-WashingTUMORSAMPLESINGLECELLSUSPENSION原代培养建立的肺癌细胞系Wehaveestablished5squamouscarcinoma(B),4adenocarcinoma(D),1largecelllungcancer(C),1smallcelllungcancer(A),and1lungcarcinoidcelllines.原代培养的肺癌细胞在NOD/SCID小鼠能形成肿瘤原代培养的肺癌细胞中含有一小群CD44强阳性的细胞Smallcelllungcancer(LC004),largecelllungcancer(LC006)havecd44strongpositivepopulationcells.CD44强阳性细胞具有较强的增值能力Whenseeded500cells/well,therewasnoobviousdifferencebetweentheCD44++andCD44+/-cells(figureA),butwhenseeded150cells/well,CD44++cellsmuchstrongerproliferativeability(figureB).CD44++细胞具有较强的克隆形成能力A:largecelllungcancercellline(LC006)B:smallcelllinecellline(LC004)只有CD44++的细胞可以形成holocloneWhensinglecellseededinto96wellplate,onlyCD44++CD+cellscouldformholoclone,100CD44++CD90+cellscouldformabout1-3holoclones.只有CD44++的细胞在超低粘附的培养板中形成细胞球AC:cellspheresformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.BD:nocellsphereformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.侵袭肿瘤干细胞干细胞有自我复制更新能力：通常情况下只有干细胞具有分裂产生子代干细胞的能力01干细胞有定向分化为功能细胞能力02已经定向分化的细胞一般情况下不能逆转化为干细胞03干细胞生物学特性干细胞分类根据来源分类胚胎干细胞成体干细胞根据分化潜能分类：全能干细胞多能干细胞单能干细胞胚胎干细胞培育过程01小分子化合物诱导：核移植如克隆羊多莉细胞融合基因转染：iPSOCT4,SOX2,KLF4,c-MYC020304干细胞的再编程多能干细胞多向分化图横向分化亚全能干细胞？肿瘤的异质性—肿瘤干细胞由正常干细胞经多基因多步骤突变累积而来由骨髓来源的干细胞与基因发生改变的组织细胞融合而来由基因发生改变已分化的细胞逆转化而来肿瘤干细胞的起源Cancerstemcellsshouldbethetherapytarget维持肿瘤生长的基础具有自我更新和多向分化的能力肿瘤组织中含量极低对常用的治疗方法耐药：如化疗、放疗、分子靶向治疗。免疫治疗如何？肿瘤干细胞的特性ABC转运蛋白在肿瘤干细胞多药耐药中的作用ABC转运子示意图(通过水解ATP将多种化疗药物泵出细胞外）易于转化为间质样细胞，表达许多成纤维细胞的特性01非肿瘤干细胞可通过EMT转变为肿瘤干细胞02肿瘤干细胞的可变性EMT-表皮细胞向间质细胞转化

MET-间质细胞向表皮细胞转化EMT（表皮细胞向间质细胞转化）是肿瘤侵袭和转移的主要机制之一，肿瘤干细胞易于侵袭和转移。01多个实验证实肿瘤干细胞具有间质细胞的生物学特性。02乳腺上皮细胞系通过EMT可产生乳腺癌干细胞。03肿瘤干细胞的间质细