乙肝病毒X基因转化人肝细胞裸鼠成瘤实验及其机制研究的开题报告.pdfVIP

乙肝病毒X基因转化人肝细胞裸鼠成瘤实验及其机制研究

的开题报告

题目：乙肝病毒X基因转化人肝细胞裸鼠成瘤实验及其机制研究

一、研究背景及意义

乙型肝炎病毒（HBV）是一种严重影响人类健康的病原体，约有3500万人患有

该病毒。尽管开发了许多疫苗和抗病毒药物，但该病仍然是全球范围内的健康问题。

HBVX基因是HBV基因组中常见的开放读码框架，经过转录和翻译后产生的X蛋白可

以促进细胞增殖，凋亡抑制并抑制DNA修复。这些功能使得HBx蛋白成为一种有争议

的致癌基因。同时，文献报道后细胞转染HGx基因后在肝部组织中时靠CellCycle的

调控，促使肝细胞增殖和致癌的发生。

本实验旨在构建乙肝病毒X基因转化人肝细胞裸鼠模型，通过研究HBx蛋白的

作用机制以及裸鼠肿瘤的生长规律来深入探究HBx蛋白在肝癌发生中的作用。

二、研究内容及方案

1.人肝细胞株的构建：本实验选用常用的肝癌细胞株HepG2进行基因转染，将

乙肝病毒X基因载体导入HepG2中，利用PCR和WesternBlot等技术验证HBx蛋白

的表达情况。

2.裸鼠肿瘤移植：将HBx基因转染的HepG2细胞移植至裸鼠体内，观察裸鼠生

长情况和监测肿瘤体积的变化。

3.机制研究：采用组学方法（包括转录组学，蛋白质组学和代谢组学等）研究

HBx基因表达的影响，以阐明HBx蛋白在肝癌发生中的作用机制。

4.药物干预：应用现有药物干预裸鼠肝癌模型，分析药物对肿瘤的影响以验证

HBx蛋白的作用机制。

三、研究预期成果

通过本实验的开展，预计获得以下成果：

1.成功构建HBx基因转染的人肝细胞株，并验证HBx蛋白的表达情况。

2.成功建立HBx肝癌裸鼠模型，并监测和记录裸鼠肝癌的生长和转移规律，为研

究HBx蛋白在肝癌发生中的作用机制提供直接的图像数据支持。

3.利用组学方法阐明HBx蛋白在肝癌发生中的作用机制。

4.验证某些药物在抑制HBx蛋白功能的同时，是否能降低裸鼠肝癌的发生率，以

期为寻找肝癌的治疗方法提供理论依据。

四、研究进度安排

实验时间为2年，初步安排如下：

第一年：

1.建立HBx转染HepG2细胞株。

2.验证HBx蛋白在细胞中的表达情况，并优化HBx基因转染条件。

3.将HBx转染HepG2细胞移植至裸鼠体内，建立裸鼠肝癌模型。

4.观察裸鼠生长情况，记录肿瘤大小并监测肝癌转移情况。

第二年：

1.采集HBx转染HepG2细胞和裸鼠肝组织样本进行蛋白质组、代谢物组和转录

组的分析，阐明HBx蛋白在肝癌发生中的作用机制。

2.应用多种药物干预裸鼠肝癌模型，监测肿瘤大小并分析药物是否能降低肝癌

的发生。

3.撰写项目结题报告和发表论文等。

五、可行性分析

本实验将涉及到细胞培养、动物实验和多个组学技术的应用，所需物品和设备较

为常见且易于获取，实验条件较为简便便利，并且该领域已有很多前人的研究做出了

大量机械性的研究工作，并且在不同程度上形成了一定的理论体系，因此，本研究具

有可行性和实用性。