糖类蛋白质脂肪的鉴定课件课件.ppt

关于糖类蛋白质脂肪的鉴定课件思考题：1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理2、常见的还原糖有哪些？取材的要求3、斐林试剂的组成，使用时的注意事项4、双缩脲试剂的组成，使用时注意事项5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何第2页,共22页，5月，星期六，2024年，5月1.实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色(1)还原糖+斐林试剂水浴加热砖红色沉淀(2)脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色第3页,共22页，5月，星期六，2024年，5月2、常见的还原糖有哪些？取材的要求还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。(常见的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖)注意：蔗糖不是还原糖3、斐林试剂的组成，使用时注意事项斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：等量混合，现配现用（NaOH+CuSO4）第4页,共22页，5月，星期六，2024年，5月1.点拨：还原糖+斐林试剂砖红色沉淀可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。（放在盛有50-65℃温水的大烧杯）水浴加热颜色变化：浅蓝色棕色砖红色第5页,共22页，5月，星期六，2024年，5月1步骤：样液制备:（取材5g，加入石英砂和5ml水）(1)取样液2ml于试管中(2)加入新配制的斐林试剂1ml（甲液和乙液等量混合均匀后再加入）盛有50-65℃温水的大烧杯）(3)水浴加热2min左右(（4）观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）第6页,共22页，5月，星期六，2024年，5月注意事项：（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果》梨》白萝卜。思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以吗？为什么？（2）试剂：斐林试剂(等量混合、现配现用)甲液：0.1g/mL的NaOH溶液乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液第7页,共22页，5月，星期六，2024年，5月4、双缩脲试剂组成，使用时注意事项第8页,共22页，5月，星期六，2024年，5月双缩脲试剂组成：A液：0.1g/mL的NaOH溶液B液：0.01g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：先加A液1mL于样液中，再加B液4滴于样液中（1）蛋白质+双缩脲试剂→紫色

第9页,共22页，5月，星期六，2024年，5月2步骤：（1）试管中加样液2mL（2）加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环境），摇匀（3）加双缩脲试剂B液4滴，摇匀（4）观察颜色变化（紫色）注：①样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试管壁，洗不干净。②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。第10页,共22页，5月，星期六，2024年，5月5.比较斐林试剂和双缩脲试剂0.1g/mLNaOH同甲液0.01g/mLCuSO40.05g/mLCuSO4还原性糖蛋白质等量混合后再加入先加A液1mL，摇匀，再加B液4滴50-65℃水浴加热砖红色沉淀紫色络合物不需加热，摇匀第11页,共22页，5月，星期六，2024年，5月6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？第12页,共22页，5月，星期六，2024年，5月3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色第13页,共22页，5月，星期六，2024年，5月（2）步骤材料的选取：含脂肪量高的组织，如花生的子叶。①取材：取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮②切片③制片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央④染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min，用吸水纸吸去染液，再滴体积分数50%的酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去多余的酒精（苏丹Ⅲ易溶于酒精中，避免影响实验结果），滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片⑤镜检观察：光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆形小颗粒→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒第14页,共22页，5月，星期六，2024年，5月8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何第15页,共22页，5月，星期六，2024年，5月用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。4、淀粉+碘→蓝色加1~2滴碘液第16页,共22页，5月，星