葛根素对oxldl诱导的thp-1巨噬细胞tlr4-nf-κb信号转导通路的影响.pdfVIP

张程美等摇葛根素对oxLDL诱导的THP鄄1巨噬细胞TLR4鄄NF鄄资B信号转导通路的影响摇第22期·2705·

doi:10.3969/j.issn.1000鄄484X.2019.22.004

葛根素对oxLDL诱导的THP鄄1巨噬细胞TLR4鄄NF鄄资B信号转导通路的

影响淤

张程美摇王高频摇(锦州医科大学附属第一医院,锦州121000)

摇摇中图分类号摇R543郾5摇摇文献标志码摇A摇摇文章编号摇1000鄄484X(2019)22鄄2705鄄06

[摘摇要]摇目的:研究葛根素对人单核细胞系来源的THP鄄1巨噬细胞表达的炎症因子及TLR4鄄NF鄄资B信号通路的影响,

探讨葛根素治疗动脉粥样硬化可能存在的调节机制。方法:100nmol/L佛波酯(PMA)刺激THP鄄1细胞24h,诱导其分化为巨

噬细胞,再分别给予oxLDL(50滋g/ml)、葛根素低剂量(10滋g/ml)和葛根素高剂量(100滋g/ml)干预。MTS法检测不同浓度葛

根素对THP鄄1细胞增殖的作用;FCM法检测THP鄄1细胞凋亡比例;qPCR法检测炎性细胞因子IL鄄6、TNF鄄琢、IL鄄1及TLR4茁、

MyD88、NF鄄资BmRNA水平;Westernblot法及细胞免疫荧光法测定TLR4、MyD88、NF鄄资B蛋白含量和表达定位。结果:10滋g/ml

和100滋g/ml葛根素对THP鄄1细胞增殖无抑制作用(P0郾05);低剂量(10滋g/ml)和高剂量(100滋g/ml)葛根素均能降低

oxLDL诱导的THP鄄1细胞凋亡比例(P0郾01),下调炎性细胞因子IL鄄6、TNF鄄琢、IL鄄1mRNA茁水平(P0郾05)及TLR4、MyD88、

NF鄄资BmRNA和蛋白质含量(P0郾05);细胞免疫荧光显示TLR4表达于细胞膜,MyD88表达于胞质,NF鄄资B表达于胞核,且低、

高剂量葛根素均能抑制TLR4、MyD88和NF鄄资B的表达强度。结论:葛根素通过下调oxLDL诱导的THP鄄1细胞TLR4鄄NF鄄资B信

号转导通路,进而抑制炎性因子表达,这可能是葛根素抗动脉粥样硬化的机制之一。

[关键词]摇葛根素;低密度脂蛋白;炎症因子;动脉粥样硬化

EffectofpuerarinonoxLDL鄄inducedTLR4鄄NF鄄资Bsignaltransductionpathway

inTHP鄄1macrophages

ZHANGCheng鄄Mei,WANGGao鄄Pin郾FirstAffiliatedHospitalofJinzhouMedicalUniversity,Jinzhou121000,China

[Abstract]摇Objective:ToinvestigatetheeffectsofpuerarinoninflammatorycytokinesandTLR4鄄NF鄄资Bsignalingpathway

expressedbyTHP鄄1macrophagesderivedfromhumanmonocyticcellline,andtoexplorethepossibleregulatorymechanismofpuerarin

onthetreatmentofatherosclerosis郾Methods:THP鄄1cellswerestimulatedby100nmol/LofPMAfor24h,differentiatedinto

macrophages,andthenadministeredwithoxLDL(50滋g/ml),lowdoseofpuerarin(10滋g/ml)andhighdoseofpuerarin(100滋g/ml).

MTSassaywasusedtodetecttheproliferationofTHP鄄1cellsbydifferentconcentrationsofpuerarin郾TheapoptosisrateofTHP鄄1cells

wasdeterminedbyFCM郾ThemRNAlevelsofinflammatorycytokinesIL鄄6,TNF鄄琢,IL鄄1and茁TLR4,MyD88andNF鄄资Bweredetected

byqPCR郾TheproteinexpressionofTLR