乳腺癌中HER-2检测.pptVIP

2电炉、带温度计的高压锅或微波炉3原位PCR仪或原位杂交炉1所需主要设备5亮视野显微镜437℃温箱标本的加热预处理酶消化用电炉，15分钟98℃–100℃所有载玻片必需全部浸入缓冲液室温10分钟或37℃3分钟严格冲洗5xSSC,75-80℃,5分钟（2）检测三大关键步骤过度酶消化酶消化不够恰当的酶消化无扩增：大于50%的肿瘤细胞中有1-5个信号点01低拷贝扩增：大于50%的肿瘤细胞核内有6-10个信号点02高拷贝扩增：大于50%的肿瘤细胞核内有大于10个信号03点或者凝结成团块状、簇状粗颗粒信号04（3）结果判读Adiploid-triploidHER2copynumberisusuallyclearCISH检测无HER2基因扩增样本乳腺癌中HER-2扩增/过度表达的临床意义1987年Slamon等首次报道乳腺癌原癌基因HER-2的扩增，导致肿瘤易复发，与患者总生存期短密切相关．SlamonDJ,etal.Science.1987,235(4785):177-82.转移性乳腺癌患者的中位生存期HER2阳性患者的生存期比正常者缩短一半以上HER2阳性 8-10个月HER2阴性 17-22个月

（一）无病生存期和总生存期短相关,肿瘤预后差.在多变量分析结果中，HER2是肿瘤复发和总生存期长短的独立预后因素复发率(P=0.001)总生存(P=0.02)至今为止已有国内外数百篇文献研究HER-2与乳腺癌的关系，国外八十多篇文献报道报道HER-2扩增／过表达与患者预后差相关．Her-2是目前公认的一个乳腺癌重要的预后/预测因子HER2阳性状态的患者无病生存期缩短无病生存概率1.000.750.500.250累计生存率024487296120144无扩增扩增基因扩增:10拷贝数无基因扩增:3拷贝数临界值:不包括死亡时间(月数)Logrankp0.001RossJS,FletcherJA.StemCells1998;16:413–428淋巴结阴性SeshadriRetal.JClinOncol1993;11:1936–42100806040200 0122436486072死亡时间(月数)HER2基因3拷贝数HER2基因33拷贝数对数秩检验p=0.001淋巴结阳性低度危险LN（-）且标本中病灶大小（pT）≤2CM分级1级瘤周脉管未见肿瘤侵犯HER2基因没有过度表达或扩增年龄≥35岁2005年St.Gallen指南乳腺癌危险度分级中度危险LN（-）阴性且有下列至少一条标本中病灶大小（pT）≥2CM分级2-3级有瘤周脉管肿瘤侵犯HER2过度表达或扩增年龄≤35岁LN1-3个（+）且未见HER2过度表达或扩增高度危险LN1-3个（+）且HER2过度表达或扩增LN4个及以上（+）2005年St.Gallen指南乳腺癌危险度分级HER2阳性状态可以预示肿瘤对常规治疗的反应情况内分泌治疗HER2阳性患者相对耐药CMF方案 HER2阳性患者相对耐药蒽环类 对大剂量蒽环类相对敏感紫杉类药物相对敏感010203040501靶向Her-2的人源化单抗02—赫赛汀95%人源化,5%鼠抗，具有高度亲和性(Kd=0.1nM)和特异性，显著降低免疫原性(HAMA)用于治疗HER2阳性乳腺癌生存率提高达45%疗效改善并持续维持生活质量赫赛汀?靶向HER2的人源化单抗Her-2阳性状态的检测方法01标本的类型：02新鲜标本、针吸活检标本、粗针穿刺标本、外科手术标本03细针穿刺液基细胞04111例IHC、CISH与FISH检测一致的乳腺癌中，53例FNAs（切除外科标本）与组织病理标本结果高度一致。05VocaturoA.NovelliF,etal.Oncologist.2006Sep;11(8):878-86.（一）组织标本的制备注意环节HER2表达在原发肿瘤和转移灶呈高度一致Study