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SOX9对肺腺癌细胞生长影响及机制研究

邓程伟;吴进盛;何淑波;罗超

【摘要】目的性别决定区Y框蛋白9(SOX9)对肺腺癌细胞生长的影响及机制研究.

方法肺腺癌细胞A549转染SOX9小干扰RNA1和小干扰RNA2,同时转染小干扰

RNA阴性对照,qRT-PCR和Westernblot检测细胞中的SOX9mRNA和蛋白,筛

选干扰效率较高的小干扰RNA,MTT检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋

亡,Westernblot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved

Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(CleavedCaspase-9)、

β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc蛋白水平.结果转染SOX9小干扰RNA1和小干

扰RNA2后的A549细胞中SOX9mRNA和蛋白水平均明显低于没有转染的细胞

(P0.05),并且转染SOX9小干扰RNA1后的细胞SOX9mRNA和蛋白水平下调

更多,而转染小干扰RNA阴性对照的细胞中SOX9mRNA和蛋白水平与没有转染

的细胞相比差异没有统计学意义(P0.05),后续选用转染SOX9小干扰RNA1后的

A549细胞.下调SOX9表达后的A549细胞增殖活性较没有转染的细胞相比明显

降低(P0.05),细胞凋亡率明显升高(P0.05),细胞中CleavedCaspase-3、

CleavedCaspase-9水平升高(P0.05),β-catenin、c-myc水平降低(P0.05).结

论下调SOX9抑制肺腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,促进细胞中Caspase-3、

Caspase-9活化,抑制细胞中Wnt/β-catenin信号通路激活.

【期刊名称】《临床肺科杂志》

【年(卷),期】2018(023)011

【总页数】6页(P1991-1996)

【关键词】肺腺癌;SOX9;生长;凋亡

【作者】邓程伟;吴进盛;何淑波;罗超

【作者单位】571700海南儋州,儋州市人民医院肿瘤内科;570102海南海口,海

南医学院第一附属医院肿瘤姑息治疗科;571700海南儋州,儋州市人民医院肿瘤内

科;571700海南儋州,儋州市人民医院肿瘤内科

【正文语种】中文

肺癌是一种常见的呼吸系统恶性肿瘤，分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌，其中非小

细胞肺癌在所有肺癌中占80%，非小细胞肺癌又包括肺腺癌、大细胞癌、鳞状细

胞癌等。肺癌早期发病临床症状不明显，超过70%的患者在确诊时已经处于肺癌

的中晚期，肺癌已经成为严重危害人类生命健康的疾病[1]。性别决定区Y框蛋白

9(sexdterminingregionY-box9,SOX9)基因最早发现于性别反转疾病中，与性

腺的发育有关，该基因编码的蛋白可以通过与其他相关因子的结合影响靶基因的转

录和表达[2]。研究显示，SOX9参与胚胎发育，具有调控细胞生长增殖的作用，

在肿瘤组织中表达异常[3]。在膀胱癌、肺癌等多种癌症组织均发现有SOX9的过

度表达，SOX9还具有维持癌细胞自我更新的作用，抑制SOX9表达后的肿瘤细胞

生长速度降低[4-5]。本实验以肺腺癌细胞为研究对象，通过细胞转染小干扰RNA

的方法下调SOX9的表达水平，以明确SOX9表达下调对肺腺癌细胞生长和凋亡

的作用，为探讨肺腺癌发病机制提供科学依据。

资料与方法

一、材料

肺腺癌细胞A549购自于美国ATCC；AlexaFluor488AnnexinV/PI凋亡检测试

剂盒为美国Invitrogen公司产品；siRNAcontrol、SOX9siRNA1、SOX9

siRNA2为英国Abbexa公司产品；Lipofectamine2000为美国Thermo公司产

品；RealtimePCR试剂盒为上海SinoBio公司产品；SOX9、甘油醛-3-磷酸脱

氢酶(glyceraldeh