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敲低及过表达G6PD对肝癌细胞增殖和迁移的影响
冯笑;刘兆宇;胡腊;陈纪涛;曾子成;刘季芳
【摘要】目的研究在人肝癌细胞株PLC/PRF/5中,敲低及过表达G6PD对细胞株
增殖、生长及迁移能力的影响.方法包装慢病毒颗粒,选用人肝癌细胞株
PLC/PRF/5建立G6PD敲低及过表达稳转细胞株,通过PCR及Westernblot检验
过表达及敲低效果,利用建立好的细胞株进行功能实验:通过实时细胞分析系统
(RTCA)记录细胞增殖及迁移曲线,EDU实验可直观显示处于DNA复制阶段的细胞
比例,以克隆形成实验反映细胞的生长能力.结果在G6PD敲低株中,细胞的倍增时
间较对照组延长,生长速率明显下降,EDU实验中处于增殖期细胞的比例较对照组下
降43.2%,克隆形成率明显下调(P0.05),敲低组的迁移速率亦明显降低,曲线分离显
著;而在过表达株及其对照组两株细胞中,增殖、生长及迁移实验结果无明显差异.结
论在肝癌细胞中降低G6PD的表达将抑制肝癌的增殖生长,为进一步研究肝癌的发
生机制及治疗方案打下了基础.%ObjectiveToinvestigatetheeffectof
knockdownoroverexpressionofG6PDonproliferation,growthand
migrationofhumanhepatocellularcarcinomacellPLC/PRF/5.Methods
Lentivirus-mediatedknock-downoroverexpressionofG6PDwasachieved
inhumanhepatocellularcarcinomacelllinePLC/PRF/5.RT-PCRand
Westernblottingassaywereusedtodetecttheoverexpressionor
knockdownofG6PD.Cellproliferationandmi-grationcurveswere
recordedbyreal-timecellanalysissystem(RTCA),thecellproportioninthe
DNAreplicationphasecanbedirectlydisplayedwithEDUexperiment,cell
growthabilitywasdetectedbycolonyformingassay.ResultsThedoubling
timeofcellsinG6PDknockdowngroupwaslongerthanthatofthecontrol
group,andthecellgrowthratedecreasedsignificantly,theproportionof
cellsinproliferativephase(43.2%)waslowerthanthatinthecontrol
group,buttheratescolonyformationandmigrationweresignificantly
decreased(P0.05,respective-ly),andthemigrationcurvesseparated
apparently.Whilenosignificantdifferencesinproliferation,growthandmi-
grationofPLC/PRF/5cellswerefoundbetweentheover-expressedstrain
andthecontrolgroup.ConclusionThereductionofG6PDexpressionin
HCCcellsinhibitstheproliferationandgrowthofHCC,whichmaylaya
foun-dationforthefurtherstudyofthepathogenesisandtreatmentof
HCC.
【期刊名称】《实用医学杂志》
【年(卷),期】2018(034)005
【总
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