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心血管生理复习题集
1大鼠呼吸面罩死腔问题的解决方法。
答:单管连接法:通过控制以下压力差来解决大鼠呼吸面罩死腔问题:
进气早期:肺内压面罩内压出气管内压
进气中末期:面罩内压肺内压出气管内压
通气过量也不易造成肺泡的损伤。
2简述如何获得存活率高、纯度高的乳鼠心肌细胞。(PPT2)
答:一、材料:1.乳鼠:出生1-3d;2.液体:培养基、小牛血清、消化酶、缓冲液及75%酒精。3.物品(均需严格消毒):眼科剪、眼科镊
(4套↑)、培养皿(2套↑)、烧杯、离心管、滴管、烧瓶及搅拌子等4超净台5台面:磁力搅拌器6培养箱7其它:离心机、血细胞计
数板.二:分离和培养:1.取出心脏放入4℃PBS(磷酸盐缓冲液)内2冲洗和减碎心脏:将心脏剪为0.5-1mm大小,放入盛有胶原酶、胰酶、
透明质酸酶的器皿中;3心肌消化及细胞收集:放入烧瓶60-80rmp,约5分钟后清离,第二次离心约10分钟,上清吸入含培养基和血清
的离心管内,收集心肌细胞离心,1000rmp、10分钟,去除上清,加入新的培养基和血清。4细胞接种:放入培养皿、培养板。三、纯化:
①差速贴壁法②化学试剂抑制法③密度梯度离心法:Percoll④流式细胞仪法⑤免疫磁珠四:鉴定:1细胞形态:倒置显微镜:细胞形
态:未贴壁呈圆形;贴壁后呈梭形、多角形,胞核1~2个、呈圆形、具有1~2清晰的核仁,细胞大小均匀生长迅速。搏动:频率130~
150次/分。单个细胞自行蠕动;当生长成片后可见呈岛屿状搏动当生长成片后可见呈岛屿状搏动。透射电镜:细胞完整胞膜皱褶整齐细
胞中肌丝线粒体清晰、分布均匀,细胞核完整。2.心肌细胞纯度;3.心肌细胞成活率测定:0.4%台盼蓝染色(1:9),免疫细胞化学肌
动蛋白胞浆阳性表达等。四、注意事项:1培养基pH值:7.0~7.4,大部分培养基应放在-20℃保存,少部分在4℃。2消化时搅拌速度很
重要,千万要越慢越好,所有操作尽量轻柔。3消化酶的选择:胰蛋白酶、胶原酶加透明质酸酶。4消化程度:过度:肌原蛋白萎缩,细
胞死亡率增加或贴壁能力减弱;不足:细胞易聚集成团状→细胞↓。5接种密度:过多:细胞易发生营养不良;过少:心肌细胞黏附延展
88
后不能相互接触。6.心肌细胞接种密度::形态学观测:1×10/L以下形态学观测:1×10/L以下提取mRNA或蛋白:5x10/L~6x
89
10/L细胞搏动:大于1×10/L。7.无论什么方法,无菌操作时关键。
3简述评定心脏收缩和舒张功能的主要指标。(P100)
答:⑴评定心脏收缩功能的主要指标:1每搏输出量(SV)和射血分数(EF)2.心排出量与心排血指数3.心脏做功4.心室功能曲线5.左室
收缩压峰值(LVSPP)6.dp/dt和dp/dt7.心肌收缩成分缩短速度(V)和收缩指数(CI)8压力-压力变化率环(LVP-dt/dp环)9压力-
maxCE
容积环10.心室收缩末期压力-容积关系11.心室射血期环肌纤维缩短程度12心室直径变化速率(dD/dt)及心室容积变化速率(dV/dt)13
心缩间期(STI)
⑵评定心脏舒张功能的主要指标:1.左室舒张末压(LVEDP)2.-dp/dt和-dp/dt;3.等容舒张时间室内压下降的时间常数(T)4.充盈量、
max
充盈速率和充盈分数5.非创伤性心脏舒张功能的测定(常用的有心尖搏动图、新阻抗微分图、超声心动图)
4简述离体心脏功能测定的方法与关键性注意事项。除测定心功能外,离体心脏还能进行哪些方面的研究。(P590)
答:离体心功能测定的方法:(1)Langendorffmode主动脉逆行灌流法(2)Workinghea
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