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实验五分光光度法测定Fe的含量

【实验目的】

1．掌握分光光度法测定铁含量的原理和技术。

2．掌握标准曲线的绘制方法。

3．学习分光光度计的使用方法。

【实验原理】

微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。邻二氮菲法准确度高，重现性好，配合物十分稳定，在pH2-9的溶液中，邻二氮菲与Fe2+生成稳定的桔红色配合物，其lgK稳=21.3，反应如下：

桔红色

桔红色

邻二氮菲与Fe3+生成3∶1的淡蓝色配合物，故在显色前用盐酸羟胺将Fe3+还原成Fe2+。

Fe2+-邻二氮菲桔红色络合物的最大吸收峰在510nm波长处，摩尔吸光系数ε=1.1×104。当最大吸收波长的单色光透过溶液时，溶液的吸光度与其组成量度有关，一定条件下符合朗伯-比耳定律（Beer-LambertLaw）:

A=lg(1/T)=εLc

其中A为吸光度，T为透光率，ε为摩尔吸光系数，L为吸收层厚度，c为吸光物质的浓度。

用分光光度法测定已知准确铁浓度c溶液的吸光度A（或透光率T），绘制出A-c标准曲线，再在相同条件下测定样品溶液的吸光度，便可从标准曲线上求得样品溶液中铁的组成量度。

本方法的选择性很高，相当于铁含量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍的Cr3+、Mn2+、V（V）、PO43-，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。

【实验器材】

1．仪器

721型分光光度计、容量瓶、移液管、滴瓶。

2．药品

铁标准溶液（10μg/ml）、5%盐酸羟胺（新鲜配制）、0.1%邻二氮菲溶液（新鲜配制）、1mol/LNaAc、铁待测样品溶液

【实验步骤】

1．标准曲线的绘制

用移液管吸取铁标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，分别置于25ml容量瓶中。各加0.5ml5℅盐酸羟胺溶液，摇匀。再加1ml0.1℅邻二氮菲溶液溶液和2.5ml的1mol/LNaAc溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀后放置15分钟（充分反应，混合均匀，颜色均匀而且有深度）。测定吸光度，用Excel等软件绘制A-c标准曲线，拟合出A-c的线性方程。

2．样品的测定

准确吸取适量样品待测溶液于25ml容量瓶中，按上述步骤操作，测定吸光度，从标准曲线上查得（或代入A-c线性方程中求得）相应的铁含量。

附：

721型分光光度计的使用方法

图

图1-24721型分光光度计

1-控制面板2-波长调节旋钮3-样品室

4-定位杆5-电源开关及插座6-比色皿7-黑体

1.开机预热

插入电源电缆（插座在仪器背后），打开开关，仪器在使用前应预热30分钟。

2.波长调整

转动波长调节旋钮，调节并使需要的波长对准波长读数窗口玻璃面上的标线。

3.设置测试模式

将黑体、空白液（比如装有蒸馏水的比色皿）放入样品室，放置过程中比色皿较光滑的一面朝向光源，粗糙的一面用弹簧片卡紧。关闭仓门，拉(推)动定位杆，首先使黑体对准光源，按动控制面板上的“模式”键，使显示屏上显示“T”模式，按动“0%T”键，使其显示“0.0%”；然后拉(推)动定位杆，使空白液对准光源，按动“100%T”键，使其显示“100.0%”；重复上两步2~3遍；最后按动“模式”键，使显示屏上显示“A”模式，即为测试模式。

4.样品测试

分别将装有标准溶液或样品溶液的比色皿放入样品室，拉(推)动定位杆使其对准光源，在显示屏上读出吸光度。

5．测毕

关上电源开关，取下电源插头。打开样品室盖，取出比色皿冲洗干净，放回盒中。