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*涂片、镜检分离培养鉴定:形态、菌落、生化反应、毒素试验(细胞毒性试验;家兔肠袢试验)
微生物学检验艰难梭菌*艰难梭菌检验程序艰难梭菌转种庖肉培养基*无芽胞厌氧菌*无芽胞厌氧菌属人体内的正常菌群,包括革兰阳性和革兰阴性的球菌和杆菌在某些特定状态下,这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染*一、主要种类、性状
和在感染中的作用无芽胞厌氧菌*与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌*革兰阴性厌氧杆菌类杆菌属临床上最重要的革兰阴性无牙胞厌氧杆菌,18个种,与人类感染密切相关的有10个种脆弱类杆菌:临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株在着色不均,两端圆而浓染,中间不着色或染色较浅,似空泡状;呈多形性;有荚膜;无鞭毛类杆菌有典型的革兰阴性菌细胞壁,但其脂多糖无内毒素活性类杆菌属是人类肠道及女性生殖道的正常菌群,可引起内源性感染,是临床上最常见的厌氧菌感染病原菌之一,尤以脆弱类杆菌最重要,占临床厌氧菌感染的25%,类杆菌分离株的50%,居临床厌氧菌分离株的首位,可引起女性生殖系统感染、脓胸、颅内感染及菌血症等*脆弱类杆菌革兰染色脆弱类杆菌脆弱类杆菌脓汁标本涂片(革兰染色)革兰阴性厌氧杆菌*脆弱类杆菌BAP:圆形、灰白色、光滑、边缘整齐,多数菌株不溶血脆弱类杆菌菌落特征(BBE平板)革兰阴性厌氧杆菌*普雷沃菌属革兰阴性厌氧杆菌临床意义产黑色素普雷沃菌寄生于人和动物的口腔、女性生殖道等部位。引起这些部位的感染为内源性感染,如牙龈炎、牙周炎、女性生殖道炎症、前庭大腺炎、尿道膀胱炎,另外,还可引起子宫内膜炎和子宫积脓,此类多为混合感染产黑色素普雷沃菌*产黑色素普雷沃菌菌落特征(厌氧血平板)普雷沃菌属革兰阴性厌氧杆菌产黑色素普雷沃菌革兰染色厌氧血琼脂平板上35℃培养48h后,初分离菌落为灰白色,后呈黄色,逐渐变为浅棕色.5~7日后变为黑色,多数菌株呈β溶血,在黑色素产生之前,用波长366nrn紫外线照射,可出现橘红色荧光,但黑色素出现后则无荧光。*革兰阴性厌氧球菌有3个属,韦荣球菌属、氨基酸球菌属、巨球菌属,其中以韦荣球菌属最重要咽喉部主要厌氧菌,常为混合感染菌之一韦荣球菌*革兰阳性厌氧球菌有消化球菌属和消化链球菌属消化链球菌属是人和动物口腔、上呼吸道、肠道和女性生殖道的正常菌群,可引起人体各种组织和器官的感染,在临床厌氧菌分离株中,占20%-35%,居第2位,仅次于脆弱类杆菌*革兰阳性厌氧球菌厌氧消化链球菌消化链球菌属厌氧血琼脂平板上形成光滑、凸起、灰白色、不透明、不溶血的小菌落,培养物常有恶臭味革兰染色*革兰阳性厌氧球菌消化球菌属黑色消化球菌革兰染色生长缓慢,在厌氧血琼脂平板上35℃培养2~4日形成黑色不溶血的小菌落,暴露于空气后变为灰白色菌落*革兰阳性厌氧杆菌丙酸杆菌属能发酵葡萄糖产生丙酸而命名人类感染最常见的为痤疮丙酸杆菌(P.acnes)双歧杆菌属正常肠道菌群,在大肠中起重要的调节作用,只有齿双歧杆菌(B.dentium)可能与龋齿和牙周炎有关真杆菌属乳杆菌属放线菌属*革兰阳性厌氧杆菌革兰阳性杆菌,微弯,呈棒状,一端钝圆,另一端尖细革兰阳性杆菌,具有多形态性,短杆或球形,单个或成双排列,偶见短链革兰阳性杆菌,具多形性,菌体呈直、弯、分叉或棒状,染色不均匀*革兰阳性厌氧杆菌革兰阳性细长杆菌,具有分枝的丝状体为本属细菌的特征革兰阳性细长杆菌,成单个、短链或栅状排列*二、致病性无芽胞厌氧菌*致病条件属正常菌群,在成为条件致病菌后,可引起内源性感染感染条件寄居部位改变宿主免疫力下降菌群失调厌氧微环境无芽胞厌氧菌*细菌毒力与混合感染的需氧菌或兼性厌氧菌协同作用通过菌毛、荚膜等表面结构吸附和侵入上皮细胞和各种組织产生多种毒素,胞外酶和可溶性代谢物无芽胞厌氧菌*感染特征内源性感染无特定病型分泌物或脓液粘稠,乳白色、粉红色、血色或棕黑色,有恶臭,有时有气体使用氨基糖苷类抗生素长期无效分泌物直接涂片可见细菌,但普通培养法无细菌生长无芽胞厌氧菌*所致疾病血流感染中枢神经系统感染脑脓肿口腔与牙齿感染齿槽脓肿和下颌骨髓炎急性坏死性溃疡性齿龈炎(奋森咽峡炎)约30%的牙周病无芽胞厌氧菌*所致疾病呼吸道感染厌氧菌可感染上下呼吸道的任何部位腹部和会阴部感染手术及损伤后感染女性生殖道感染无芽胞厌氧菌*三、微生物学检查法标本采取从感染中心处采取切取或活检得到的组织标本从感染深部吸取的渗出
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