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•456•20215355JChinPractDiagnTher,May2021Vol.35No.5
中华实用诊断与治疗杂志年月第卷第期,,
•论著•
泛素连接酶LRSAM1对人神经胶质母细胞瘤细胞
生物学行为的影响及其可能机制
梁博,王新军,王建业,周少龙,杨卓,刘荣俊
郑州大学第五附属医院神经外科,河南郑州450052
摘要:目的探讨泛素连接酶LRSAM1在CD166降解中的作用及其对人神经胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影
响。方法人神经胶质母细胞瘤U-87MG细胞,采用免疫共沉淀法检测LRSAM1与CD166是否存在结合;将对数生
UMGpcDNA3.1-LRSAM1pcDNA3.1-NCpcDNA3.1-LRSAM1
长期-87细胞分为组、组和空白对照组,组和
pcDNA3.1-NC组细胞分别转染pcDNA3.1-LRSAM1质粒载体和PcDNA3.1空质粒载体,空白对照组细胞正常培养,采
PCR3LRSAM1mRNAWesternblotLRSAM1
用实时荧光定量法检测组细胞相对表达量,采用法检测蛋白相对表达
量,采用免疫荧光染色法检测LRSAM1与CD166表达情况,采用细胞克隆形成实验检测细胞集落形成数目,采用
ArmexinV-FITC/PITnmswell
染色检测细胞凋亡率,采用细胞划痕试验检测细胞划痕愈合率,采用小室实验检测侵袭
细胞数。结果U-87MG细胞中LRSAM1与CD166存在结合。pcDNA3.1-LRSAM1组细胞LRSAM1mRNA和蛋白
相对表达量3(.26士0.28、0.72±0.06)均髙于空白对照组(1.00±0.03、0.18±0.0.1)和pcDNA3.1-NC组0(•99士0.02、
0.19±0.02)(P0.05)U-87MGLRSAM1CD166pcDNA3.1-LRSAM1LRSAM1
,转染成功。细胞与共定位,
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