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脊髓损伤中钙蛋白酶的作用

袁景(综述);甄平(审校)

【摘要】脊髓损伤后可发生不同程度的神经坏死和组织变性,导致脊髓神经功能障

碍。脊髓继发性损伤过程中钙蛋白酶(calpain)在脊髓损伤中发挥重要作用。

Calpain为一Ca2+依赖性半胱氨酸蛋白酶,该酶包括2种同分异构体μ-calpain和

m-calpain,分别由微摩尔和毫摩尔浓度的Ca2+激活。细胞内calpain以非活性酶

原形式存在,细胞内游离Ca2+浓度升高后,calpain酶原被活化,引起calpain活化

后一系列分子生物化学的改变,在脊髓引起细胞凋亡或损伤。应用calpain的特异

性抑制剂进行干预后,脊髓calpain的表达和活性受到抑制,脊髓的病理改变和细胞

凋亡得到缓解,神经功能得以保护。该文将calpain在脊髓损伤发展过程中的作用

作一综述。

【期刊名称】《临床骨科杂志》

【年(卷),期】2014(000)004

【总页数】7页(P475-481)

【关键词】脊髓损伤;钙蛋白酶;calpain抑制剂

【作者】袁景(综述);甄平(审校)

【作者单位】甘肃中医学院研究生院临床医学系，甘肃兰州730020;会宁县人民

医院骨科，甘肃会宁730700;甘肃中医学院研究生院临床医学系，甘肃兰州

730020;兰州军区总医院关节外科，甘肃兰州730050

【正文语种】中文

【中图分类】R683.2;R345

脊髓损伤是指由于外界直接或间接因素导致脊髓在损害的相应节段出现各种运动、

感觉和括约肌功能障碍，肌张力异常及病理反射等的相应改变。脊髓损伤后可发生

不同程度的神经坏死和组织变性,导致神经功能障碍，甚至损伤平面以下神经功能

完全丧失。脊髓功能的障碍往往较原发性的脊髓结构损伤更加严重。这主要是因为

在遭受机械性损伤后，脊髓发生了一些生化和细胞水平的变化，加重了神经细胞和

神经传导束的损伤，最终导致了不可逆性的功能损害。这种脊髓遭受损伤后引起的

一系列病理生理变化，称之为继发性损伤。进入继发性损伤阶段，表现为多种有害

因子释放，毒性化学产物从破裂的神经细胞膜溢出，加之缺血及局部电解质的紊乱

形成了继发性损伤的瀑布效应，破坏的细胞、轴突、血管释放毒性化学产物攻击破

坏周围完好的细胞。其中细胞内Ca2+浓度升高导致的钙蛋白酶(calpain)过度激活

是脊髓变性或坏死的病理途径[1]，脊髓继发性损伤过程中calpain发挥重要作用。

1Calpain概述

1.1Calpain的构成Calpain是一种Ca2+依赖性非溶酶体半胱氨酸蛋白酶(蛋白分

解酶)，已发现15种，相关编码基因共15个，其中13个编码15种大亚基，2个

编码2种小亚基[2]。Calpain家族成员互为同工酶，有的分布广泛，如calpainⅠ

和calpainⅡ；有的则表现出很强的组织特异性，如calpainⅢa主要分布于骨骼

肌，而calpainⅧa，calpainⅧb主要分布于胃组织。该类蛋白酶需要Ca2+激活，

对底物进行有限水解后发挥生理作用，该酶具有催化水解功能外的调节功能，可以

把胞内的Ca2+浓度升高信号转变为与信号传导途径有关的蛋白水解信号[3]。

Calpain由1个大亚基(80ku)和1个小亚基(30ku)组成异二聚体。大亚基有4个

结构域(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)：结构域Ⅰ位于N-末端，与Ca2+结合后可发生自降解，

引起蛋白酶构象改变；结构域Ⅱ是由Cysl05、His262、Asn2863个氨基酸残基

组成酶的活性中心，结构域Ⅲ是抑制蛋白或激活蛋白结合的部位；结构域Ⅳ是

Ca2+结合的部位。小亚基有2个结构域，结构域Ⅰ富含甘氨酸和疏水氨基酸，是

酶与细胞膜结合的部位；结构域Ⅱ与大亚基结构域Ⅳ结构相似，也含有Ca2+结合

位点[4-5]。μ-calpain和m-calpain是最常见的两种calpain亚型，在体外分别

需要微摩尔和毫摩尔浓度的Ca2+激活。μ-calpain和m-calpain均为一杂合二聚

体结构，由1个80ku的催化活性亚单位和1个30ku的调节活性亚单位构成。

80ku大催化亚基包含N-末端的α-螺旋，后面连接4个结构域(DⅠ～Ⅳ)。DⅠ

在calpain被Ca2+激活的最初阶段发生解离。DⅡ分为次结构域Ⅱα(DⅡα)和

Ⅱβ(DⅡβ)。DⅡα含有的半胱氨酸