DB22T 2529-2016 紫穗玉米花青素测定 分光光度法　.docxVIP

ICS65.020.20B05

备案号：54206-2017DB22吉林省地方标准

DB22/T2529—2016

紫穗玉米花青素测定分光光度法

Determinationofanthocyanidinsinpurplecorn—Spectrophotometry

2016-12-09发布2017-03-01实施

吉林省质量技术监督局发布

I

DB22/T2529—2016

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。

本标准起草单位：吉林省农业科学院。

本标准主要起草人：魏春雁、张之鑫、武巍、杨建、王巍巍、王莹、张国辉、樊慧梅、刘笑笑、马虹。

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DB22/T2529—2016

紫穗玉米花青素测定分光光度法

1范围

本标准规定了紫穗玉米花青素含量分光光度测定方法。

本标准适用于紫穗玉米中花青素含量的测定。本标准中花青素的定量限为0.00110g/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

花青素anthocyanidins

存在于植物中的一类类黄酮有机化合物，又称花色素。

4原理

样品经盐酸-乙醇混合溶液提取，离心分离，花青素类化合物在酸性条件下呈红色，在波长520nm下有最大吸收，用可见分光光度计测定吸光度，与标准系列比较定量。

5试验条件

常温条件下。

6试剂或材料

除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水符合GB/T6682规定三级水。

6.1试剂

6.1.1盐酸：36%～38%。

6.1.2无水乙醇。

6.1.3盐酸-乙醇混合溶液：移取8.0mL浓盐酸，用无水乙醇（6.1.2）定容至1000mL。

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6.2标准品

矢车菊素（CAS：528-58-5）：纯度≥98%。

6.3标准溶液配制

6.3.1标准储备液：准确称取矢车菊素0.01g，精确至0.0001g，置于50mL容量瓶中，用盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）定容，浓度为200mg/L，4℃条件下，贮存于密闭棕色试剂瓶中避光保存。6.3.2系列标准使用溶液：分别移取0.00mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL标准储备液（6.3.1）于50mL容量瓶中，用盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）定容至刻度，浓度分别为0.0mg/L、0.4mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L。

7仪器设备

7.1可见分光光度计。

7.2分析天平：感量±0.1mg。

7.3超声波清洗器：超声频率40KHz。

7.4离心机：转速≥10000r/min。

7.5粉碎机：转速≥10000r/min。

8样品

样品风干处理至水分含量在15%以下，取籽粒，粉碎后，全部通过0.25mm孔径筛，密封、避光、冷藏。

9试验步骤

9.1样品溶液制备

称取样品（称量范围在0.2000g～3.0000g之间，具体称样量的确定参考附录A），置于100mL三角瓶中，加入40mL盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3），置于超声波清洗器（7.3）中，30℃提取30min，将提取液转移到100mL容量瓶中；向三角瓶中再加20mL盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3），30℃超声提取10min，提取液转移到同一容量瓶中，再重复1次，合并提取液到容量瓶中，以盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）定容，摇匀。分取10mL，10000r/min离心10min，吸取上清液，待测。

9.2标准曲线测定

取系列标准溶液于比色皿中，以盐酸-乙醇混合溶液（6.1.3）为空白，在520nm波长下测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标，相应的吸光度为纵