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第49卷第6期吉林大学学报(医学版)Vol.49No.6

2023年11月JournalofJilinUniversity(MedicineEdition)Nov.20231457

[文章编号]1671‑587X(2023)06‑1457‑09DOI:10.13481/j.1671‑587X

lncRNAGPRC5D-AS1对地塞米松诱导小鼠成肌细胞肌萎缩的

抵抗和再生作用及其机制

张瑞鹏,李杰

(吉林大学第一医院干部病房,吉林长春130021)

[摘要]目的目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)GPRC5D-AS1对地塞米松诱导的小鼠成肌细胞

肌萎缩的抵抗和再生作用,并阐明其作用机制。方法:选取对数生长期C2C12细胞,检测0、25、

50、75、100、200和400mg·L-1地塞米松诱导24、48和72h后C2C12细胞存活率,筛选肌萎缩模

型诱导的最佳作用剂量和时间。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测C2C12细胞中lncRNA

GPRC5D-AS1表达水平以验证细胞模型。将C2C12细胞分为正常组、模型组、lncRNAGRPC5D-

AS1-NC组和lncRNAGRPC5D-AS1-OE组,RT-qPCR法检测各组细胞中lncRNAGPRC5D-AS1表达

水平,流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细

胞中谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、铁离子(Fe2+)和丙二醛(MDA)水平,透射电镜观察各组细胞

线粒体超微结构表现,免疫荧光法检测各组细胞中成肌分化蛋白(MyoD)表达情况,Western

blotting法检测各组细胞中铁死亡相关蛋白表达水平。结果结果:100mg·L-1地塞米松诱导48h时造模效

果最佳。与正常C2C12细胞比较,100mg·L-1地塞米松诱导48h后C2C12细胞中lncRNAGPRC5D-

AS1表达水平降低(P0.05),证实lncRNAGPRC5D-AS1在肌萎缩模型中有调控作用。RT-qPCR

法检测,与正常组比较,模型组细胞中lncRNAGRPC5D-AS1表达水平降低(P0.05);与模型组

和lncRNAGRPC5D-AS1-NC组比较,lncRNAGRPC5D-AS1-OE组细胞中lncRNAGRPC5D-AS1表

达水平升高(P0.05)。流式细胞术检测,与正常组比较,模型组细胞中ROS水平升高(P0.05);

与模型组和lncRNAGRPC5D-AS1-NC组比较,lncRNAGRPC5D-AS1-OE组细胞中ROS水平降低

(P0.05)。ELISA法检测,与正常组比较,模型组细胞中Fe2+和MDA水平升高(P0.05),

GPX4水平降低(P0.05);与模型组和lncRNAGRPC5D-AS1-NC组比较,lncRNAGRPC5D-AS1-

OE组细胞中Fe2+和MDA水平降低(P0.05),GPX4水平升高(P0.05)。透射电镜观察,正常

组细胞外形圆整,大小正常,膜上绒毛丰富,线粒体细胞器形态正常;模型组细胞中线粒体数量减

少,胞浆颗粒化,线粒体结构模糊肿胀并出现典型铁死亡相关现象;lncRNAGRPC5D

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