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关于糖类脂肪蛋白质的检测一、还原糖的鉴定可溶性还原糖+斐林试剂砖红色沉淀水浴加热葡萄糖、果糖、麦芽糖是。蔗糖不是在水浴加热的条件下,还原糖和斐林试剂反应,生成砖红色沉淀。A:实验原理:第2页,共14页,5月,星期六,2024年,5月B:实验步驟:?选材:含糖量高,颜色为白色或近于白色。?制备样液:苹果块----研磨-------过滤?水浴加热苹果汁注意:斐林试剂不稳定,一般配成甲乙液,现配现用,用时将甲乙两液等量混合后再加入样液中斐林试剂:甲液0.1g/ml的NaOH溶液;乙液0.05g/ml的CuSO4溶液苹果汁斐林试剂第3页,共14页,5月,星期六,2024年,5月颜色变化:浅蓝色--棕色--砖红色第4页,共14页,5月,星期六,2024年,5月设置对照组第5页,共14页,5月,星期六,2024年,5月1.怎样配制斐林试剂?用浓度为0.1g/mlNaOH(甲液)与等量的0.05g/mlCuSO4(乙液)混合均匀而成。NaOH+CuSO4Cu(OH)2蓝色沉淀+……Cu(OH)2+还原糖Cu2O砖红色沉淀+……问题思考2.为什么斐林试剂可检验还原糖的存在?斐林试剂的本质是Cu(OH)2的悬浊液,还原糖把Cu(OH)2还原成Cu2O沉淀。3.为什么要用新配制的试剂?因为斐林试剂稳定性较差,要现用现配,混合使用。第6页,共14页,5月,星期六,2024年,5月二、脂肪的鉴定A:实验原理:脂肪+苏丹III染液橘黄色脂肪+苏丹IV染液红色B:实验步驟?选材:花生种子最好,浸泡.?制备样品:花生去皮------切薄片.?鉴定:花生切片d显微镜观察c制片b50%酒精漂洗a苏丹III染色实验现象:脂肪+苏丹III染液橘黄色脂肪+苏丹IV染液红色第7页,共14页,5月,星期六,2024年,5月显微镜第8页,共14页,5月,星期六,2024年,5月三、蛋白质的鉴定A:实验原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色反应B:实验步驟:?选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释),鲜肝提取液.?制备样液:大豆----研磨------过滤?鉴定步驟:豆浆b再加双缩脲试剂B液a先加双缩脲试剂A液0.1g/ml的NaOH溶液,先为实验制造碱性环境.0.01g/ml的CuSO4溶液第9页,共14页,5月,星期六,2024年,5月蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应第10页,共14页,5月,星期六,2024年,5月①B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。②鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免实验后粘住试管壁,不易洗刷第11页,共14页,5月,星期六,2024年,5月斐林试剂与双缩脲试剂比较原理不同:斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液;双缩脲试剂实质是碱性环境中的Cu2+。第12页,共14页,5月,星期六,2024年,5月四、淀粉的检测与观察淀粉遇碘变蓝第13页,共14页,5月,星期六,2024年,5月感谢大家观看第14页,共14页,5月,星期六,2024年,5月
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