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64中国美容医学2017年10月第26卷第10期ChineseJournalofAestheticMedicine.Oct.2017.Vol.26.No.10
具有皮肤美容应用潜能的透皮型弹性蛋白样多肽的制备
12221
白转丽,都慧聪,耿文鑫,李立文,舒茂国
(1.西安交通大学第一附属医院整形美容·颌面外科陕西西安710061;2.西北大学西部资源生物与现代生物技术教育
部重点实验室陕西西安710069)
[摘要]目的:设计、制备透皮型弹性蛋白样多肽(elastin-likepolypeptide,ELP)融合蛋白,探索其作为皮肤美容制剂
的潜能。方法:设计具有透皮特性的蛋白转导功能域(proteintransductiondomain,PTD)和ELP融合蛋白PTD-ELP,联合
密码子优化、重叠延伸PCR和定向递归连接等技术构建其原核表达载体。在此基础上将该载体转化至大肠杆菌中,进行异丙
基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导表达并对目标蛋白的亚细胞定位和可溶性进行分析。结
果:成功构建了携带PTD-ELP读码框架的原核表达载体,携带该载体的大肠杆菌在IPTG诱导5h时PTD-ELP融合蛋白的表达量达
到峰值,约占菌体总蛋白的23.6%;亚细胞定位分析表明PTD-ELP融合蛋白主要以包涵体形式在胞内表达。结论:成功设计并
构建了能够表达PTD-ELP融合蛋白的原核表达载体并在大肠杆菌中实现了其高效表达,为深入探讨PTD介导的ELP透皮给药在
逆转皮肤衰老和预防、治疗光老化中的应用奠定了基础。
[关键词]弹性蛋白样多肽;蛋白转导功能域;原核表达;重组蛋白
[中图分类号]Q591.2[文献标志码]A[文章编号]1008-6455(2017)10-0064-04
PreparationofanElastin-likePolypeptideFusionProteinwithTransdermalProperties
asaSkinCosmeticsAgent
12221
BAIZhuan-li,DUHui-cong,GENGWen-xin,LILi-wen,SHUMao-guo
(1.DepartmentofPlasticMaxillofacialSurgery,theFirstAffiliatedHospitalof
Education,NorthwestUniversity,Xian710069,Shaanxi,China)
Abstract:Objective
deliveredtoskintissuestoexploreitspotentialasaskincosmeticsagentinthefuture.Aproteintransduction
Methods
thesolubilityoftherecombinantproteinwereanalyzed.AprokaryoticvectorcontainingPTD-ELP-codingcassette
Results
analysisdemonstratedthatPTD-ELPproteinwassubcellularlylocatedincytop
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