37-0815-大鼠心肌组织SOD活力的测定结果.pdf

浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：37

实验时间：8月15日13:30－17:30请勿透露学校、教师和个人信息

大鼠心肌组织SOD活力的测定

【实验结果】

依据SOD活力计算公式：组织匀浆中的SOD活力（U/mL）=（对照管吸光度-测定管吸光度）/对照

管吸光度÷50%×（反应液总体积/取样量（mL））÷组织中蛋白含量（mgprot/mL），进行SOD活力计算，

与对照组比较，模型组SOD活力降低，但无显著性差异（P0.05）；与模型组比较，OJP1-100、OJP1-300

组及普萘洛尔组的SOD活力升高，但无显著性差异（P0.05）(表1，图1）。

表1OJP1对心肌缺血大鼠SOD活力的影响（×±s，n=6)

组别SOD活力

正常组35.52±18.290

模型组30.244±10.081

OPJ1-100组42.165±13.16

OPJ1-300组41.478±18.020

普萘洛尔组45.189±22.43

注：普萘洛尔组：阳性对照组；OPJ1-100：麦冬多糖100mg/kg组；OPJ1-300：麦冬多糖300

mg/kg组。

图1OJP1对心肌缺血大鼠SOD活力的影响

【实验讨论】

实验结果显示：与对照组比较，模型组SOD活力降低；经药物治疗后，OJP1-100、OJP1-300组及普萘

洛尔组的SOD活力较模型组增高，但统计学分析均无显著性差异（P0.05）。本实验所用试剂盒测定SOD

方法为黄嘌呤氧化酶法，据文献报道，在黄嘌呤氧化酶法中影响超氧化物歧化酶(SOD)活性测定的干扰因

素较多，组织匀浆中含有较多干扰物质，其中蛋白质的干扰最大，可能与蛋白质本身带有的一些化学基团

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更容易与超氧阴离子自由基反应有关。接下去将重复实验来验证实验结果。

氧自由基是一类化学活性很高的不稳定基团，能与构成机体的细胞膜和细胞器的多价不饱和脂肪酸发

生过氧化反应，从而导致细胞损伤。在生理情况下OFR不断产生，同时也被机体内存在的有效OFR清除

剂不断清除，使OFR水平保持在产生与清除的动态平衡中。但当OFR产生过多或机体清除OFR的能力减

弱时，过多的OFR将作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致

机体代谢紊乱。另外，OFR水平增高还可以损伤血管内皮细胞，使内皮下胶原、微纤维和基底膜暴漏于血

流吸引血小板黏附、集聚，并使血管舒张因子合成减少、活性减弱，引起缩血管物质活力相对增加，致使

血管过度收缩，而SOD能清除氧自由基，故SOD活力可以一定程度的体现心肌受损程度。

【注意事项】

1.所有试的配制应在测试前一天完成，目的是使其充分溶解，测试前从冷藏箱中拿出的试剂及样品要在室

温下放置30min再用

2.为避免测试误差，第一次吸的试剂应丢弃，吸嘴外周若挂有液体，要用滤纸轻轻擦干，样品和试剂要垂

直加入试管，不应加在管壁上

3.水浴前应用漩涡混匀器充分混匀样品

4.对照管应做2只，且放在所有测试管的中间做，取其平均值