33-0812-大鼠心肌透射电镜标本制作——半薄切片实验结果.pdf

浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：33

实验时间：8月12日8:30－15:30请勿透露学校、教师和个人信息

大鼠心肌透射电镜标本制作——半薄切片

【实验结果】

图1为光学显微镜下观察到的经甲苯胺兰染色后的大鼠心肌组织半薄切片，从左至右，切片染色程度

依次加深，由灰白色到紫色再至深蓝色。

图1大鼠心肌组织半薄切片（×100）

【实验讨论】

本实验中，较为关键的步骤便是甲苯胺兰染色及半薄切片，一方面，在染色过程中，须控制好所滴加

的染色液的剂量（一般滴加一滴甲苯胺兰染色液保证覆盖全部切片即可），同时，还须保证适当的染色时

间，一般，滴加染液后，须在酒精灯上个均匀烘烤20秒左右，然后让载玻片自然冷却或轻轻吹气冷却，

若染色时间过短，将导致切片染色程度低，镜下观，切片颜色较浅；若染色时间过长，又将导致切片染色

过深（如图1所示）。另一方面，在固定好的组织块打磨过程中发现组织块中有几个并没有放置于固定模

中间底部，因此给打磨带来了一定的难度，但经过反复打磨修改，最终使组织块置于固定块顶部，但不呈

方形，因此在切片后得到的标本呈现一定的变形，镜下观，呈不规则形态，边缘不整齐。

【注意事项】

1.刀槽中的蒸馏水可能是污染源，须及时更换，使用新鲜蒸馏水

2.注意切片时碎屑对水槽的污染

3.切片时不宜过快或过慢，否则样片会卷曲

4.在染色时每次加热后一定要充分冷却，使切片充分黏贴在载玻片上

5.注意切片时碎屑对水槽的污染

6.刀槽中的蒸馏水可能是污染源，尽可能用新鲜蒸馏水

7.在加完水后，要小心水不能加太多，否则切片会因粘到水而粘到组织固定块上

浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号：33

实验时间：8月12日8:30－15:30请勿透露学校、教师和个人信息

8.切片修样后加水前，要吹尽前几次的切片碎屑，防止对取样片的污染

9.染色时间不宜过久或者过短，否则会切片染色会过深或过浅

10.烘片过程中，须控制烘烤时间，并保证烘烤后充分冷却，使切片固定于玻片上，保证在水洗时切片不易

被洗去。