白细胞血小板配血试验.ppt

试验分步原理血清红细胞悬液加入LIM混合液Polybrene受体血型抗原IgG抗体迅速致敏第29页,共46页，星期六，2024年，6月试验分步原理Polybrene分子连接到红细胞上加入Polybrene第30页,共46页，星期六，2024年，6月试验分步原理离心Polybrene拉近红细胞间的距离并造成凝集1个IgG分子同时连接两个红细胞第31页,共46页，星期六，2024年，6月试验分步原理加入重悬液减弱了Polybrene的作用加重悬液第32页,共46页，星期六，2024年，6月试验分步原理已被血型抗体致敏的红细胞不会散开阳性结果第33页,共46页，星期六，2024年，6月试验分步原理未被血型抗体致敏的红细胞很快散开阴性结果第34页,共46页，星期六，2024年，6月注意事项按比例加样致敏时间观察非特异性凝集观察结果关于冷凝集第35页,共46页，星期六，2024年，6月聚凝胺方法的特点灵敏：灵敏度比抗球蛋白方法高1-20倍。速度快：实验时间5分钟左右。准确：准确度高于酶试验。不适合于Kell系统抗体的检测，但黄种人群中Kell系统抗体极罕见。操作要求较高第36页,共46页，星期六，2024年，6月（2）微柱凝胶技术第37页,共46页，星期六，2024年，6月微柱凝胶技术第38页,共46页，星期六，2024年，6月????凝胶技术的原理

?反应室外管壁反应室底孔内套管壁凝胶或玻璃珠亲和凝胶试剂或盐水特殊粘液第39页,共46页，星期六，2024年，6月凝胶技术的原理：A、反应室：下端底孔很小，液体在孵育过程中不会流入下方微柱中。B、试剂或盐水层：红细胞在离心力作用下穿越该层，红细胞与反应室中的血清分离并与该层液体中的试剂反应。C、粘液：亲和柱中有一层粘液，作用与“试剂或盐水层”相同。第40页,共46页，星期六，2024年，6月1）敏感：在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题。2）结果可保存凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日，并且较容易被拍成照片。3）操作技术要求较低：凝胶试验的操作主要是简单的加样和判读，孵育、离心过程都有专门的设备。其中能被人为改变的因素较少。4)无需洗涤的抗球蛋白试验：优点：第41页,共46页，星期六，2024年，6月缺点：凝胶试验方法成本较高，需要特殊设备。高度敏感有时也会造成不便：有报导应用凝胶试验后，1/300的库血直抗阳性。第42页,共46页，星期六，2024年，6月2不完全抗体可以结合在红细胞表面,但是不能和两个红细胞同时结合（致敏）。3加入抗人球蛋白1红细胞彼此之间有一定的间距4抗人球蛋白可以同时和两个不完全抗体的FC段结合，从而把红细胞连接在一起。（3）抗人球蛋白交叉配血法示意图第43页,共46页，星期六，2024年，6月1.试剂红细胞(表面标有抗血小板抗体)2.加入供者血小板3.试剂红细胞和血小板特异性结合4.加入受者的血清,如有抗血小板抗体,则和血小板发生特异性结合5.凝胶柱中的抗人球蛋白捕获抗血小板抗体,导致试剂红细胞凝集。（4）血小板配血实验原理示意图（阳性）第44页,共46页，星期六，2024年，6月1.试剂红细胞(表面标有抗血小板抗体)2.加入供者血小板3.试剂红细胞和血小板特异性结合4.加入受者的血清,如血清中无抗血小板抗体,则凝胶柱中的抗人球蛋白不发生特异性结合，试剂红细胞仍呈单个分布。血小板配血实验原理示意图（阴性反应）第45页,共46页，星期六，2024年，6月感谢大家观看第46页,共46页，星期六，2024年，6月**关于白细胞血小板配血试验一、人类白细胞抗原人类白细胞抗原代表个体特异性与移植排斥有关的抗原称为组织相容性抗原或移植抗原-MHS编码MHS的基因组称为主要组织相容性复合物(MHC)人类的MHC是首先在白细胞上发现的，称为人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen，HLA)第2页,共46页，星期六，2024年，6月HLA的研究历史最早发现人类白细胞抗原者为Dausset-1954年HLA不仅仅是白细胞特异性同种抗原。它是分布广泛的组织抗原。第3页,共46页，星期六，2024年，6月HLA的分型命名血清学分型命名具有临床意义的HLA基因有A、B、C、DR、DQ、DP等位点(Loci)，每个位点又有若干等位基因，这些基因的产物便是HLA抗原。临床意义比较大的HLA-A、B、C称为Ⅰ类抗原HLA-DR、DQ、DP称为Ⅱ类抗