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任务一、血液细胞检查
[实验目的与要求]
1、掌握显微镜红细胞计数的原理和操作。
2、掌握红细胞形态检查的方法、正常红细胞的形态特点、异常红细胞形态学变化。
3、掌握显微镜白细胞计数的方法。
4、掌握外周血白细胞分类计数的方法、各种白细胞的正常形态和病理形态学改变。
[实验方法]
1、学生分组:6-7人/组;
2、教师通过ppt或操作示范等教学手段引导学生回顾血液细胞检查的相关基础知识;
3、教师运用各种器材和试剂进行讲解、操作示范;
4、学生分组进行操作练习;
5、教师逐一指导、检查学生受训情况;
6、教师总结学生受训情况。
[实验条件要求]
1、实验所需器材(设备):显微镜、分光光度计。
2、所需耗材:采血用具一套,试管、试管架、吸管(2ml、5ml、0.5ml)、吸耳球、微量吸管、
胶吸头、干脱脂棉、玻璃棒、改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布、香柏油、拭镜纸、清洁液
(乙醚与无水乙醇比例3:7)
3、试剂:
(1)红细胞稀释液:枸橼酸纳1.0g,36%甲醛液1.0ml,氯化钠0.6g,加蒸馏水至100ml,混
匀,过滤2次备用;
(2)白细胞稀释液:2%冰乙醇溶液中加入10g/L结晶紫(或亚甲蓝)3滴。
(3)瑞氏染液;
(4)磷酸缓冲液(pH6.4~6.8)
4、标本:EDTA抗凝静脉血或末梢血。
[实验内容]
1、相关基础知识回顾:红细胞计数的检测原理,氰化高铁血红蛋白测定的原理,白细胞计数的
原理,白细胞分类计数的原理。
2、操作要点讲解及示范:
(1)红细胞计数:准确稀释红细胞,充分冲池,计数计算。
(2)红细胞形态检查:血片的制作和染色。
(3)白细胞计数:准确稀释血液,充分冲池,计数计算。
(4)白细胞分类计数、白细胞形态:血涂片制备,染色,镜检。
3、学生操作练习。
4、教师总结学生操作情况。
[实验评分]
血液细胞检查评分标准
标实
项扣
名称操作要求准得
目分
分分
白大衣穿戴整齐(1分),教材、实验报告、中性笔等用品准备齐全
准
(1分),按学号正确取放显微镜,检查显微镜并填写显微镜使用登5
备
记本(2分),检查并放置好相关实验物品(1分)
准确加入红细胞稀释液(2分);消毒皮肤,准确取血(2分);擦去
管尖外面多余的血液,插入稀释液底部,吸取其上清液清洗吸管;
充入血细胞计数池内,注意充池的液量要适宜,使之恰好充满,无
红细胞气泡及多余液体溢出(5分)。静置2~3min,使红细胞下沉(2分)。
20
计数将血细胞计数板置于显微镜下,用低倍镜观察计数池内红细胞分布
状况是否均匀(2分),如红细胞分布均匀,即可用高倍镜进行计数
(5分)。计数完毕后,用清水将计数盘和盖玻片冲洗干净,待干后
备用(2分)。
血涂片制备:取末梢血一滴,置于载玻片一端(1分),将推片的一
操端,放在血滴前面,逐渐后移接触血滴,血滴即沿推片散开(2分),
作然后使推片与载玻片
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