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中国人兽共患病学报
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｏｏｎｏｓｅｓ２００７。２３（７）
６６４
文章编号：１００２—２６９４（２００７）０７—０６６４—０３
结核分枝杆菌Ｒｖｌ００９基因真核
表达质粒的构建及表达＊
薛莹，柏银兰，高辉，王丽梅，徐志凯
摘要：目的构建结核分枝杆菌Ｒｖｌ００９基因真核表达载体。方法ＰＣＲ扩增Ｒｖｌ００９基因・测序正确后克隆入真核表
达载体ｐＣＤＮＡ３．１（），重组质粒酶切鉴定正确后以阳离子聚合物转染Ｐ８１５细胞后。分别以ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ表达
和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果构建了重组质粒ｐＣＤＮＡ－Ｒｖｌ００９，ＲＴ－ＰＣＲ结果证明Ｒｖｌ００９可在Ｐ８１５
细胞中转录，用间接免疫荧光检测，表达有Ｒｖｌ００９蛋白的细胞着染。结论成功构建了结核分枝杆菌Ｒｖｌ００９基因的真核表
达载体ｐＣＤＮＡ－Ｒｖｌ００９，Ｒｖｌ００９基因可以在Ｐ８１５细胞中表达。
关键词：结核分枝杆菌；Ｒｖｌ００９；表达
中图分类号：Ｒ３９２．１１文献标识码：Ａ
Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｅｕｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｆｏｒｇｅｎｅｓ
ｏｆＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓＲｖｌ００９ｓｔｒａｉｎ
ＸＵＥＹｉｎｇ，ＢＡＩＹｉｎ—ｌａｎ，ＧＡＯＨｕｉ，ＷＡＮＧＬ—ｍｅｉ，ｉＸＵＺｈｉ—ｋａｉ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｏｆｔＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃｉｎｅ・ＦｏｕｒｔｈＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ’ａｎ７１００３２，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＴｈｅｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓＲｖｌ００９ｓｔｒａｉｎｗａｓｆｉｒｓｔｌｙａｍｐｌｉｆｉｅｄｂｙＰＣＲ
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