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微生物培养基配制实验报告(共5篇)

培养基的制备与灭菌实验报告(详细)

一、实验题目：培养基的制备与灭菌

二、实验目的：

1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。

2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。

三、实验器材：

1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。

2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、

移液管、试管架、铁针、量筒。

四、实验原理：

1、培养基的制备

包括一下几种成分：

（1）水分：主要成分。

（2）N源：包括无机氮和有机氮。

（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。

（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。

微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。

有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或

核酸等。

2、培养基配置的原则

根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机

物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。

培养基有以下分类：

按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基

按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基

按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基

培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。

3、灭菌：

用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实

验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。

（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭

菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸

点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min

可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。若是含糖培养基，110℃、

30min。

（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。因高

温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间

长。

（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。

（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。

除病菌需更小。

五、实验步骤：

1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备

依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，

加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼

脂。加上棉塞，迅速拔出能发出清脆声响即可，用报纸包住并系

好麻绳。

2、包移液管和培养皿

（1）包一包培养皿（一包五个）：用手压紧、塞好，折出棱角，

包好后摇晃没有培养皿相互碰撞的声音即可。

（2）包2支移液管：用棉花塞好移液管尾部，露出1~2cm即

可。取长条报纸，一端折

90°角，紧密严实沿30°角卷好移液管，尾部叠好防止散开。

3、高压蒸汽灭菌

（1）灭菌前要先看水位是否合适。

（2）将包好的待灭菌物品放入内层锅，不要装得太挤，棉塞不

应染上培养基。

（3）加盖，两两对称旋紧螺栓。

（4）设定条件：0.1MPa、121℃、20min，进行加热。

（5）先打开排气阀，待空气排尽后，关上排气阀。

（6）结束后，自然降温，压力降为0后，打开排气阀取出物品。

4、干热灭菌

（1）将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱内，关好门箱。

（2）设定条件：160~170℃，恒温2h。

（3）结束后，切断电源，自然降温，降到70℃以下后开箱取

物。

六、思考题：

1、你配制的是什么培养基？

选择培养基。

2、选择培养基与鉴别培养基的区别？这两种培养基的应用情况。

选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化

学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的

劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。如以纤维素作唯

一碳源的培养基可分散到分解纤维素的微生物分散酵母菌或霉菌

时，可添加适量的青霉素、四环素或链霉素，以抑制细菌和放线

菌的生长。

鉴别培养基是在成分中加入有能与目的菌的无色代谢产物发生

显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从

近似菌落中找到目的菌菌落的培养基，此类培养基一般用于鉴定

不同微生物。如EMB即伊红美乳糖造就基。大肠杆菌分解乳糖产

生大量混合酸，可染上酸性伊红，伊红和美兰结合，菌落被染成