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第2课时微生物的选择培养和计数
基础巩固
1.某些土壤细菌可将尿素[CO(NH2)2]分解为CO2和NH3供植物吸收和利用,但分解物CO2不能为该菌提供营养。下列关于配制分离这一菌种的选择培养基的成分符合要求的是()
A.仅尿素 B.尿素+葡萄糖
C.仅葡萄糖 D.牛肉膏蛋白胨
答案:B
解析:由题意可知,该土壤细菌是异养微生物,要配制分离这一菌种的选择培养基需要含碳有机物作为碳源,尿素作为唯一氮源。
2.下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,下列叙述错误的是()
A.能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素
B.图中逐级稀释的程度会直接影响细菌培养基上菌落的数量
C.培养基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以提供无机盐和作为缓冲剂
D.培养基①应以尿素为唯一氮源,培养基②加入酚红会变蓝
答案:D
解析:分解尿素的细菌可以产生脲酶将尿素分解为氨,使pH升高,培养基中加入酚红指示剂后,呈红色。
3.在自然环境中,常常是多种微生物混杂在一起,要对其中的某种微生物进行研究,就必须获得其纯培养物,以排除其他微生物的干扰。下列关于微生物纯化培养的叙述,错误的是()
A.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源
B.测定土壤样品中的细菌数量,常用稀释涂布平板法
C.分离土壤中不同类别的微生物要采用不同的稀释度
D.平板划线法可用于微生物的分离和计数
答案:D
解析:平板划线法可以对微生物进行分离,但不能计数,稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数。
4.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时,甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基,乙组实验所用的培养基中的氮源除尿素外还有硝酸盐,其他成分都相同,在相同条件下操作,培养观察。则乙组实验属于()
A.空白对照 B.条件对照
C.自身对照 D.标准对照
答案:B
解析:生物实验中的对照实验可以分为空白对照、条件对照、自身对照、标准对照等。①空白对照是指不给予对照组施加任何处理因素。②条件对照是指虽给对照组施以部分实验因素,但不是所要研究的处理因素。③自身对照是指对照和实验都在同一研究对象上进行,不另设对照组。④标准对照是指用现有标准方法或常规方法作对照,将观察测定的实验数值与标准值相比较,以确定其正常与否。根据以上分析可知,甲组实验与乙组实验的培养条件不同,形成了条件对照。
5.土壤是微生物的天然培养基,下面是有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验过程。请据图回答下列问题。
(1)为分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用的选择培养基进行分离。
(2)若取土样5g,应加入配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大,需要不断加以稀释,配制成上图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前,一定要以减少误差。分别吸取103~107倍稀释的稀释液0.1mL加到固体培养基上,用涂布器将菌液分散。每个浓度稀释液至少接种个平板,以减少实验误差。?
(3)将接种的培养皿在37℃的中培养24~48h,观察并统计,结果如下表所示。请找出合适浓度,计算出每克土样中细菌数:。
稀释倍数
103
104
105
106
107
平均菌落数/个
500
367
248
26
18
答案:(1)以尿素为唯一氮源
(2)45mL无菌水摇匀(振荡、混匀)3
(3)倒置恒温培养箱菌落数2.48×108个
解析:(1)尿素分解菌能分解尿素,而其他微生物在尿素作为唯一氮源的培养基上会因为缺少氮源而不能生长。所以为分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行分离。(2)若取土样5g,应加入45mL无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。取样稀释前,一定要振荡使菌体分布均匀,以减少误差。分别吸取103~107倍稀释的稀释液0.1mL加到固体培养基上,用涂布器将菌液分散。每个浓度稀释液至少接种3个平板,以减少实验误差。(3)将接种的培养皿倒置在37℃的恒温培养箱中培养24~48h,观察并统计菌落数。计数时选择的合适的稀释倍数应以相应的平板上出现30~300个菌落为宜,所以应选择的稀释倍数为105。根据表格数据可推测出每克土样中细菌数为248÷0.1×105=2.48×108(个)。
能力提升
1.在Ⅰ~Ⅲ3个培养皿中分别加入10mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36h,计算菌落数,结果如下表所示。下列相关叙述正确的是()
培养皿
培养基成分
菌落数/个
Ⅰ
琼脂、葡萄糖
35
Ⅱ
琼脂、葡萄糖、特殊营养物质
250
Ⅲ
琼脂、特殊营养物质
0
A.该实验采用的是液体培养基
B.该实验采用平板划线法接种
C.Ⅰ和Ⅲ对照,说
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