灭菌及无菌空气的制备.ppt

3、种子培养基实罐灭菌从夹层通入蒸汽间接加热至80℃，再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，进行直接加热，同时，关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为110℃，维持10min。4、发酵培养基实罐灭菌从夹层或盘管通入，蒸汽间接加热至90℃，再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，进行直接加热，同时，关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为105℃，维持5min。5、.发酵培养基连续灭菌一般培养基为130℃，维持5min，谷氨酸发酵培养基为115℃，6~8min。第32页,共51页，星期六，2024年，5月第二节空气除菌城市上空空气中含有的细菌数为3000-10000个/m3，因此在空气引进发酵罐之前必须进行严格处理，除去其中含有的微生物和其他有害成分。抗生素、氨基酸和酶制剂等多数品种发酵，耗氧量大，无菌程度要求十分严格.一、通风发酵对无菌空气的要求1.空气中微生物的分布空气中含菌量随环境的不同而有很大的差异。2.发酵对空气无菌程度的要求一般按染菌机率为10-3来计算，即1000次发酵周期所用的无菌空气只允许1次失败。第33页,共51页，星期六，2024年，5月空气除菌设备空气过滤除菌的目的Ns10-3个/m3，同时使空气有一定压力空气过滤除菌流程普通空气冷却除菌流程高效前置过滤除菌流程第34页,共51页，星期六，2024年，5月高效前置过滤除菌流程第35页,共51页，星期六，2024年，5月空气预处理流程空气除菌总流程如下：

高空采风→粗滤器→空压机→贮罐→冷却器→油水分离器→丝网分离器→加热器→总过滤器→分过滤器→发酵罐第36页,共51页，星期六，2024年，5月空气除菌方法加热灭菌（220°C，20秒）

[灭菌彻底，能耗大，成本高]静电除菌

[除菌效果差，仅用于初除菌]辐射灭菌

[254-265nm效果最佳，仅限表面灭菌]介质过滤除菌

[主流的除菌方式]第37页,共51页，星期六，2024年，5月空气压缩机余热灭菌图第38页,共51页，星期六，2024年，5月过滤除菌(Filtersterilization)及其控制按除菌机制可分为：1绝对（表面）过滤2深层介质过滤第39页,共51页，星期六，2024年，5月1绝对（表面）过滤定义：滤空在表面；依靠直接拦截捕获颗粒。特点：易于控制过滤后的空气质量，节约能量和时间，但孔隙小于0.5μm，材料较贵，容量有限。常用滤膜第40页,共51页，星期六，2024年，5月第41页,共51页，星期六，2024年，5月2、深层介质过滤除菌定义：1、污染物被介质内部结构捕获的一种过滤介质，滤孔贯穿于整个介质厚度。2、调整流道可以获得高容污能力第42页,共51页，星期六，2024年，5月是以棉花、玻璃纤维、尼龙等纤维或活性炭作为介质填充成一定厚度的过滤层，或将超细玻璃纤维、聚乙烯醇、聚四氟乙烯、金属烧结材料制成过滤层，其介质的空隙大于被滤除的尘埃或微生物。空气流通过这种介质过滤层时，借助惯性碰撞、拦截滞流、静电吸附、扩散等作用，将其尘埃和微生物截留在介质层内，达到过滤除菌目的。特点：设备及操作费用低廉，适用于大量空气的处理。第43页,共51页，星期六，2024年，5月2．空气除菌设备以纤维状物或颗粒状物为介质空气过滤器所构成的过滤器以微孔滤纸、滤板、滤棒构成的过滤器(1)纤维状或颗粒介质过滤器过滤层厚度大，体积大，压力降大，操作麻烦，装填介质费时费力。(2)过滤纸类过滤器除菌效率相当高，对0.3μm以上颗粒的过滤效率达99.99%以上，阻力小，压力降小，但强度不大，尤其是受潮后强度更差。第44页,共51页，星期六，2024年，5月一般用于总过滤器一般用于分过滤器第45页,共51页，星期六，2024年，5月发酵罐空气过滤器第46页,共51页，星期六，2024年，5月简答：影响灭菌的因素有哪些？问题1灭菌温度和时间培养基的物理状态培养基的pH值培养基中的微生物数量微生物细胞中水含量微生物细胞菌龄微生物的耐热性空气排除情况搅拌泡沫